Anti-SPHK1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q9NYA1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SPHK1-Funktion und Lokalisierung

• SPHK1 (Sphingosinkinase 1), auch bekannt als SK1 und Acetyltransferase SPHK1, ist ein multifunktionales Enzym, das durch das SPHK1-Gen (Gene ID: 8877) beim Menschen kodiert wird. Es gehört zur Sphingosinkinase-Familie und spielt eine Schlüsselrolle im Sphingolipidstoffwechsel und der Signalübertragung.
• Katalysiert die Phosphorylierung von Sphingosin zu Sphingosin-1-phosphat (S1P), einem bioaktiven Lipidmediator mit intrazellulären und extrazellulären Funktionen. Wirkt spezifisch auf D-Erythro-Sphingosin und Sphinganin, nicht jedoch auf andere Lipide. Verwandte Referenzen: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• Im Gegensatz zur proapoptotischen SPHK2 reguliert es intrazelluläre Ceramidspiegel negativ, fördert das Zellwachstum und hemmt die Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:16118219
• Vermittelt TNF-Signalübertragung: stimuliert über S1P die TRAF2 E3-Ubiquitin-Ligase-Aktivität und fördert die NF-kappa-B-Aktivierung, was zur IL-17-Sekretion führt. Reguliert auch die RANTES-Induktion über den p38 MAPK-Weg als Reaktion auf TNF negativ. Verwandte Referenzen: PMID:20577214, PMID:23935096
• Zeigt Serin-Acetyltransferase-Aktivität auf PTGS2/COX2 in einer Acetyl-CoA-abhängigen Weise, beeinflusst die neuronale Sekretion spezialisierter präresolvierender Mediatoren (SPMs) wie 15-R-Lipoxin A4 während Neuroinflammation.
• Lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran, Endosomenmembran, Clathrin-beschichteten Gruben und Synapsen, was seine vielfältigen Rollen in der Signalübertragung und dem Membrantransport widerspiegelt.
• Weit verbreitet exprimiert, mit höchsten Konzentrationen in erwachsener Leber, Niere, Herz, Skelettmuskel und Hirnrinde. Verwandte Referenzen: PMID:29662056
• Enthält ATP-Bindungs- und Calmodulin-Bindungsdomänen; reguliert durch Phosphorylierung und alternatives Spleißen (UniProt-Schlüsselwörter: Kinase, Transferase, Phosphoprotein, Alternatives Spleißen).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die N-terminale Region (aa 1-160) von humanem SPHK1 (NP_001136074.1) entwickelt. Diese Region ist bei mehreren Isoformen gemeinsam und kann eine breite Detektion ermöglichen; überprüfen Sie die Sequenzausrichtung für isoform-spezifische Anforderungen.
• Für Western Blot wird ein Band nahe 43 kDa erwartet, aber posttranslationale Modifikationen oder alternatives Spleißen können zu Bandenverschiebungen führen. Optimieren Sie Ladekontrollen und Antikörperverdünnung mit relevanten positiven und negativen Lysaten.
• Für ELISA sollten Sie die Kombination mit für SPHK1 validierten Capture/Detektionsantikörpern in Betracht ziehen. Validieren Sie die Assay-Spezifität mit rekombinantem Protein und geeigneten Negativkontrollen.
• Verwenden Sie Gewebe- oder Zelllysate mit bekannter SPHK1-Expression (z.B. Leber, Niere oder Hirnrinde) als positive Kontrollen und schließen Sie eine negative Kontrolle ein (z.B. SPHK1-Knockdown oder Gewebe mit geringer Expression).

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