Anti-SPHK1 polyklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - Q9NYA1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SPHK1

• SPHK1, auch bekannt als SPHK, ist eine Sphingosinkinase, die die Phosphorylierung von Sphingosin zu Sphingosin-1-Phosphat (S1P) katalysiert – einem zentralen Lipidmediator mit intra- und extrazellulären Funktionen (PubMed:11923095, PubMed:20577214, PubMed:23602659). Zugehörige Referenzen: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• Im Gegensatz zur proapoptotischen SPHK2 fördert SPHK1 das Zellwachstum und hemmt die Apoptose. Außerdem beteiligt es sich unabhängig von seiner Kinaseaktivität an der endozytischen Membranvermittlung und der endosomalen Reifung (PubMed:16118219, PubMed:24929359, PubMed:28049734). Zugehörige Referenzen: PMID:16118219, PMID:24929359, PMID:28049734
• Über S1P stimuliert SPHK1 die Aktivität der E3-Ubiquitin-Ligase TRAF2 und fördert die NF-kappa-B-Aktivierung als Reaktion auf die TNF-Signalgebung, was zur IL-17-Sekretion führt. Es reguliert außerdem die RANTES-Induktion über den p38-MAPK-Weg negativ (PubMed:20577214, PubMed:23935096). Zugehörige Referenzen: PMID:20577214, PMID:23935096
• Darüber hinaus weist SPHK1 Serin-Acetyltransferase-Aktivität auf PTGS2/COX2 auf, die durch Sphingosin verstärkt wird, und fördert die neuronale Sekretion von spezialisierten pro-resolvierenden Mediatoren während der Neuroentzündung.
• Subzellulär lokalisiert sich SPHK1 im Zytoplasma, Zellkern, an der Zellmembran, Endosomenmembran, in Clathrin-beschichteten Vertiefungen und an der Synapse.
• SPHK1 ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in der Leber, Niere, Herz und Skelettmuskulatur von Erwachsenen; auf Proteinebene wird es auch in der Hirnrinde nachgewiesen.
• Schlüsselwörter heben seine Rolle bei dem Lipidstoffwechsel, der Calmodulinbindung, Phosphorylierung und alternativen Spleißung hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 201-300 von humanem SPHK1 umfasst (NP_001136074.1). Polyclonale Antikörper, die gegen diese Region generiert wurden, können mehrere Isoformen oder posttranslational modifizierte Formen erkennen. Forschende sollten die Spezifität in ihrem experimentellen Kontext überprüfen.
• Für IHC-P empfehlen sich Gewebe mit hoher SPHK1-Expression (z. B. Leber oder Niere) als Positivkontrollen; Antigenrettung und Antikörperverdünnung sollten empirisch optimiert werden.
• Im ELISA kann der Antikörper zur Detektion von SPHK1 in Zelllysaten oder rekombinanten Proteinpräparationen verwendet werden; geeignete Blockierungs- und Waschbedingungen müssen bestimmt werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, aber die Sequenzhomologie der Immunogenregion bei diesen Spezies sollte zur Bestätigung der erwarteten Erkennung überprüft werden.
• Als polyclonaler Antikörper kann er zur Detektion von denaturiertem oder nativem SPHK1 geeignet sein, aber denaturierende Western-Blot-Bedingungen sind aufgrund der Anwendungsbeschränkungen möglicherweise nicht optimal; bei der Verwendung für andere Anwendungen ist eine Validierung erforderlich.

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