Anti-SPDEF-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95238

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SPDEF

• SPDEF (Prostata-abgeleiteter Ets-Faktor), auch als PDEF bekannt, ist ein SAM-pointed-Domäne-enthaltender Ets-Transkriptionsfaktor, der vom SPDEF-Gen kodiert wird. Er gehört zur ETS-Familie der Transkriptionsfaktoren und enthält eine pointed (PNT)-Domäne sowie eine ETS-DNA-Bindungsdomäne.
• SPDEF fungiert als androgenunabhängiger Transaktivator des Promotors des prostataspezifischen Antigens (PSA) und bindet spezifisch an 5'-GGAT-3'-DNA-Sequenzen. Diese Aktivität unterstreicht seine Rolle bei der Regulation des Prostataepithels.
• Er wirkt außerdem als transkriptioneller Aktivator des SERPINB5-(Maspin)-Promotors, eines Gens, das an der Tumorsuppression und der Hemmung der Metastasierung beteiligt ist.
• Die Gewebeexpression ist stark auf hormonregulierte Epithelgewebe beschränkt, wobei die höchsten Werte in der Prostata auftreten. Deutlich niedrigere Expressionswerte werden in der Milchdrüse, der Speicheldrüse und dem Eierstock beobachtet. SPDEF wird auch in Prostatakarzinomzellen exprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation ist nukleär, was mit seiner Funktion als Transkriptionsfaktor übereinstimmt.
• Laut UniProt unterliegt SPDEF alternativem Spleißen, und seine dreidimensionale Struktur wurde aufgeklärt (Schlüsselwort „3D-Struktur“). Diese Merkmale können die Antikörpererkennung und funktionelle Untersuchungen beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen war ein rekombinantes Fusionsprotein, das das humane SPDEF in voller Länge (AS 1-335) abdeckt; aufgrund des alternativen Spleißens kann der Antikörper mehrere Isoformen erkennen. Bestätigen Sie die Spezifität in Ihrem System, wenn mehrere Banden auftreten.
• Das von UniProt vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 37,5 kDa, während der Lieferant 38 kDa angibt. Geringfügige Verschiebungen der elektrophoretischen Mobilität in der SDS-PAGE können durch posttranslationale Modifikationen oder die Laufbedingungen verursacht werden.
• Dieser Antikörper ist für WB, IHC-P, IF/ICC und ELISA geeignet. Für IHC-P sollten Sie eine Optimierung der Antigen-Retrieval-Protokolle in Betracht ziehen, da nukleäre Antigene möglicherweise stärkere Demaskierungsschritte erfordern.
• Bei IF/ICC wird eine nukleäre Färbung erwartet; verwenden Sie eine Gegenfärbung wie DAPI, um die subzelluläre Lokalisation zu überprüfen. Validieren Sie den Antikörper in Ihrer spezifischen Zelllinie oder Ihrem Gewebe.
• Eine Kreuzreaktivität mit Ratte ist angegeben. Überprüfen Sie bei Rattenexperimenten die Leistung anhand positiver und negativer Kontrollen, da die Reaktivität zwischen verschiedenen Stämmen variieren kann.

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