Anti-SPARC Kaninchen-Polyclonales Antikörper für IHC-P, ELISA - P09486

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SPARC

• SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine), auch bekannt als Osteonectin oder BM-40, ist ein matrizelluläres Glykoprotein, das Zell-Matrix-Interaktionen moduliert und das Zellwachstum reguliert.
• Es bindet Kalzium- und Kupferionen und interagiert mit verschiedenen Komponenten der extrazellulären Matrix einschließlich Kollagenen, Thrombospondin und Albumin sowie mit Wachstumsfaktoren wie PDGF und Zellmembranen.
• SPARC enthält zwei Kalziumbindungsdomänen: eine niederaffine saure Domäne, die 5–8 Ca²⁺-Ionen bindet, und ein hochaffines EF-Hand-Motiv.
• Das Protein wird in den extrazellulären Raum sezerniert und ist Bestandteil der Basalmembran, was mit seiner Rolle bei Gewebsumbau und -reparatur übereinstimmt.
• Zu den wichtigsten Merkmalen gehören mehrere Disulfidbindungen, Glykosylierung und die Assoziation mit Osteogenesis imperfecta bei Mutationen.
• SPARC wurde durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomik-Ansätze identifiziert, was seine Häufigkeit und klinische Relevanz unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das reife SPARC-Protein (Reste 18–303), das beide Kalziumbindungsdomänen abdeckt; für IHC-P sollten Antigen-Retrieval und Blockierungsschritte berücksichtigt werden, um konformationsabhängige Epitope zu erhalten.
• Für ELISA immobilisieren Sie das Antigen unter Bedingungen, die die Integrität von Disulfidbindungen erhalten, und prüfen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität mit anderen matrizellulären Proteinen.
• Bei der Färbung von Geweben von Mensch, Maus oder Ratte validieren Sie den Antikörper für die entsprechende Spezies durch Einbeziehung von Positiv- und Negativkontrollen, da polyclonale Antikörper Chargenschwankungen aufweisen können.
• Als Ausgangspunkt empfehlen sich Verdünnungen von 1:50 bis 1:500 für IHC-P und 1:1000 bis 1:5000 für ELISA, die je nach Nachweissystem und Probentyp optimiert werden können.

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