Anti-Sorting Nexin-5 (SNX5) monoklonaler Antikörper für IHC-P und ELISA - Q9Y5X3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SNX5-Funktion und Lokalisierung

• Sorting Nexin-5 (SNX5) ist eine Komponente des Retromer-Membran-verformenden SNX-BAR-Subkomplexes, der den retrograden Transport von Fracht von Endosomen zum trans-Golgi-Netzwerk (TGN) vermittelt. SNX5 interagiert mit Membranen, die Phosphatidylinositol-3-phosphat (PtdIns(3P)) oder Phosphatidylinositol-3,4-bisphosphat (PtdIns(3,4)P2) enthalten. Verwandte Referenzen: PMID:15561769
• SNX5 ist am retrograden Transport des lysosomalen Enzymrezeptors IGF2R beteiligt, erleichtert dessen Recycling und trägt zur lysosomalen Funktion bei. Verwandte Referenzen: PMID:17148574 PMID:18596235
• SNX5 spielt eine Rolle bei der Internalisierung des epidermalen Wachstumsfaktorrezeptors (EGFR) nach EGF-Stimulation und ist an der endosomalen Sortierung und dem Abbau von EGFR über einen Retromer-unabhängigen Mechanismus beteiligt, der die PIP5K1C-Isoform 3 einbezieht. Verwandte Referenzen: PMID:23602387
• Es reguliert die Sortierung und den Abbau von E-Cadherin, indem es den PIP5K1C-Isoform 3-vermittelten Abbau hemmt und beeinflusst so die Zelladhäsionsdynamik. Verwandte Referenzen: PMID:24610942
• SNX5 ist auch an der Makropinozytose beteiligt, einem Prozess, der für die nicht-selektive Flüssigkeitsphasenaufnahme und den Membrantransport essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:18854019 PMID:21048941
• Subzellulär lokalisiert SNX5 an frühen Endosomenmembranen, zytoplasmatischen Vesikeln, der Zellmembran und Zellprojektionen wie phagozytischen Kappen und Rüschen, was seine Rolle bei der dynamischen Membranumgestaltung unterstreicht.
• Das Protein enthält eine Phox-Homologie-(PX)-Domäne, die Phosphoinositide bindet, sowie eine BAR-Domäne zur Erkennung der Membrankrümmung. Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und es wurde in Wirt-Virus-Interaktionen impliziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung eines rekombinanten Fusionsproteins entworfen, das die Aminosäuren 28–127 von humanem SNX5 umspannt. Dies entspricht einer Region, die potenziell exponiert und für die Erzeugung von Antikörpern mit Spezifität für den N-terminalen Teil des Proteins geeignet ist.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Formalin-fixierte, Paraffin-eingebettete Gewebeschnitte mit geeigneter Antigen-Demaskierung verwendet werden. Beginnen Sie mit einem empfohlenen Verdünnungsbereich basierend auf endogenen Expressionsniveaus und validieren Sie mit positiven und negativen Kontrollgeweben.
• Die Reaktivität des Antikörpers im ELISA deutet darauf hin, dass er das Immunogen gut erkennt; führen Sie bei der Durchführung von ELISA gereinigtes rekombinantes SNX5 als positive Kontrolle und präimmune Seren als negative Kontrolle mit.
• Obwohl die Kreuzreaktivität für Maus und Ratte bestätigt ist, ist es ratsam, den Antikörper in Ihrem spezifischen Modellsystem zu validieren, insbesondere wenn Sie Nachweismethoden jenseits von IHC-P und ELISA verwenden (z. B. ist Western Blotting nicht als validierte Anwendung aufgeführt, daher wäre eine zusätzliche Verifizierung erforderlich).
• Für Studien, die endosomalen Transport oder Abbau-Assays beinhalten, könnte der Antikörper für Immunfluoreszenz oder Co-Immunpräzipitation nützlich sein, aber solche Anwendungen sollten empirisch validiert werden.

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