Polyklonaler Anti-Sonic-Hedgehog-(Shh)-Kaninchenantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15465

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Sonic Hedgehog (Shh)

• Das Sonic-Hedgehog-Protein (Shh), das vom SHH-Gen kodiert wird, ist ein Morphogen-Vorläufer mit Aliasnamen wie HHG-1 und ShhNC. Es gehört zur Familie der entwicklungsregulierenden Hedgehog-Signalmoleküle.
• Der Volllängen-Vorläufer durchläuft im endoplasmatischen Retikulum eine Autoproteolyse und eine Cholesterin-Transferase-Aktivität und wird dabei in die N-terminale Signaldomäne (ShhN) und das C-terminale Fragment (ShhC) gespalten, wobei Cholesterin an ShhN gebunden wird. Zugehörige Referenzen: PMID:29954986 PMID:29995851 PMID:30139912
• Das zweifach lipidmodifizierte ShhN wirkt als Morphogen, indem es an den Patched-Rezeptor (PTCH1/PTCH2) bindet, die Hemmung von Smoothened (SMO) aufhebt und dadurch den SMO-Signalweg sowie die Transkription nachgeschalteter Zielgene aktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:10753901 PMID:24522195 PMID:24863049 PMID:29995851 PMID:31548691
• Shh ist für zahlreiche Entwicklungsprozesse von entscheidender Bedeutung, darunter die Musterbildung des zentralen Nervensystems, die Bildung der anterior-posterioren Achse der Gliedmaßenknospe, die Festlegung ventraler Zellschicksale im Neuralrohr und in den Somiten sowie die Axonführung.
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich Shh an der Membran des endoplasmatischen Retikulums und der Membran des Golgi-Apparats und wird in den extrazellulären Raum sezerniert; außerdem ist es über seine Lipidmodifikationen mit der Zellmembran assoziiert.
• Zu den wichtigsten Stichwörtern gehören autokatalytische Spaltung, Kalziumbindung, Entwicklungsprotein, krankheitsassoziierte Varianten (Holoprosenzephalie, Mikrophthalmie), Glykoprotein, Lipoprotein und Zinkbindung.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Aufgrund der Verarbeitung des Shh-Vorläufers zu ShhN und ShhC kann die Western-Blot-Analyse mehrere Banden nachweisen; gegen die C-terminale Region (AS 231-330) gerichtete Antikörper können sowohl den Volllängen-Vorläufer (ca. 50 kDa) als auch möglicherweise verarbeitete Fragmente erkennen.
• Bei Immunfluoreszenz und Immunzytochemie kann ein Signal an der Plasmamembran, am Golgi-Apparat oder am endoplasmatischen Retikulum beobachtet werden, was den Transport und die Sekretion des Proteins widerspiegelt. Für eine präzise Lokalisation wird eine Ko-Färbung mit Organellenmarkern empfohlen.
• Dieser polyklonale Antikörper, der in Kaninchen mit einem synthetischen Peptid als Immunogen hergestellt wurde, kann eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität aufweisen; beziehen Sie in jedes Experiment geeignete positive und negative Kontrollen ein.
• Obwohl der Antikörper für humane Proben validiert wurde, wurde die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies nicht getestet. Überprüfen Sie daher bei der Verwendung nicht-humaner Proben die Reaktivität im jeweiligen Modellsystem.

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CamelBio ist ein umfassender Beschaffungspartner für Rohmaterialien für die In-vitro-Diagnostik (IVD) und unterstützt Entwickler diagnostischer Verfahren sowie Forschende vom Konzept bis zur klinischen Anwendung. Für Untersuchungen des Hedgehog-Signalwegs und der Entwicklungsbiologie liefern wir validierte Antikörper wie diesen polyklonalen Anti-Shh-Antikörper sowie optimierte monoklonale/polyklonale Antikörperpaare, zusätzliche Reagenzien in großen Mengen und die Beschaffung seltener Rohmaterialien für spezifische Zielstrukturen. Unser Portfolio wurde entwickelt, um Ihre Assay-Entwicklung und Skalierung mit zuverlässigen, hochwertigen Bioreagenzien zu vereinfachen.