Monoklonaler Anti-Sonic Hedgehog (Shh)-Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA – Q15465

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Sonic Hedgehog (Shh)

• Sonic Hedgehog (SHH) wird als Vorläuferprotein synthetisiert, das eine autoproteolytische Spaltung und Cholesterinmodifikation durchläuft, um die aktive N-terminale Signaldomäne (ShhN) und ein C-terminales Fragment (ShhC) zu erzeugen. Verwandte Referenzen: PMID:29954986, PMID:29995851, PMID:30139912
• Der doppelt lipidierte ShhN-Morphogen bindet an den Patched-Rezeptor (PTCH1/PTCH2), hebt die Hemmung von Smoothened (SMO) auf und aktiviert die Transkription nachgeschalteter Zielgene. Verwandte Referenzen: PMID:10753901, PMID:24522195, PMID:24863049, PMID:29995851, PMID:31548691
• SHH lokalisiert während der Prozessierung im Endoplasmatischen Retikulum und an der Golgi-Membran; das reife, sezernierte ShhN kann an die Zellmembran binden.
• SHH spielt eine entscheidende Rolle bei der Embryonalentwicklung, einschließlich der Musterbildung des Zentralnervensystems, der Spezifikation der Gliedmaßenknosachse und der Axonführung.
• Das Protein enthält eine zinkbindende Proteasedomäne und weist Hydrolase- und Transferaseaktivitäten auf, was seine autokatalytische Spaltung und Cholesterintransferfunktionen widerspiegelt.
• Mutationen in SHH sind mit Entwicklungsstörungen wie Holoprosenzephalie und Mikrophthalmie verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 200-300 von menschlichem SHH umfasst; diese Region kann zwischen Arten konserviert sein, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht der Volllängeform 50 kDa, aber prozessierte Formen können bei niedrigeren Molekulargewichten auftreten; validieren Sie mit geeigneten Kontrollen.
• Bei Immunofluoreszenzanwendungen (IF/ICC, IF-P) optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für den spezifischen Zell- oder Gewebetyp und bestätigen Sie die Lokalisationsmuster im Vergleich zu veröffentlichten Daten.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung von Antikörperpaaren oder rekombinanten Proteinstandards, um die Assay-Empfindlichkeit zu bestimmen.

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