Anti-SMPD3-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – Q9NY59

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SMPD3

• SMPD3 codiert die neutrale Sphingomyelinase 2 (nSMase2), die Sphingomyelin hydrolysiert und dabei das bioaktive Lipid Ceramid sowie Phosphocholin erzeugt.
• Das von SMPD3 produzierte Ceramid vermittelt die zelluläre Apoptose und das Wachstumsarrest, wobei das Enzym diese beiden Prozesse unabhängig voneinander regulieren kann.
• SMPD3 fungiert in konfluenten Zellen als Wachstumsunterdrücker und reguliert dadurch den Zellzyklus.
• SMPD3 spielt eine entscheidende Rolle bei der postnatalen Entwicklung und trägt zur Mineralisierung von Knochen und Dentin bei. Zugehörige Referenzen: PMID:10823942 PMID:14741383 PMID:15051724
• SMPD3 hydrolysiert außerdem Sphingosylphosphocholin und bindet anionische Phospholipide wie Phosphatidylserin und Phosphatidsäure, die seine Aktivität und subzelluläre Lokalisierung modulieren.
• Auf subzellulärer Ebene ist SMPD3 an der Membran des Golgi-Apparats und an der Zellmembran lokalisiert.
• SMPD3 unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen.
• SMPD3 wird überwiegend im Gehirn exprimiert und könnte an der IL-1β-induzierten JNK-Aktivierung in Hepatozyten sowie an der NF-κB-vermittelten Regulation von NOS2/iNOS unter entzündlichen Bedingungen beteiligt sein (aufgrund von Ähnlichkeiten).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die C-terminale Region (AS 416–655), was eine Isoformspezifität verleihen kann; validieren Sie die Antikörperspezifität für Ihr Zielsystem mithilfe einer Peptidblockierung oder von Knockdown-Kontrollen.
• Beim Western Blot liegt die erwartete Bande bei etwa 71 kDa. Optimieren Sie die Proteinbeladung und die Blockierungsbedingungen und verwenden Sie Lysate aus Gehirngewebe (Mensch, Maus oder Ratte) als Positivkontrollen, da SMPD3 stark im Gehirn exprimiert wird.
• Führen Sie bei ELISA-Anwendungen serielle Verdünnungen des Antikörpers durch, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen; verwenden Sie rekombinantes SMPD3-Protein als Positivkontrolle.
• Die Palmitoylierung von SMPD3 (wie von UniProt angegeben) kann die Migration oder die Antikörperbindung beeinflussen; während der Probenvorbereitung sollten denaturierende und reduzierende Bedingungen beibehalten werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; überprüfen Sie jedoch die Färbemuster anhand von Knockout- oder Überexpressionsmodellen, um die Spezifität sicherzustellen.

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