Anti-SMPD1 (KO-validiert) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF-F, IHC-P, ELISA - P17405

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SMPD1

• SMPD1 kodiert für Sphingomyelinphosphodiesterase, auch bekannt als saure Sphingomyelinase (aSMase). Alternatives Splicing erzeugt Isoformen; das Protein existiert in zwei enzymatischen Formen durch alternierenden Transport: eine endolysosomale, die andere sezernierte. Verwandte Referenzen: PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:9660788
• In den Lysosomen wandelt aSMase Sphingomyelin in Ceramid um, spielt eine entscheidende Rolle beim Cholesterinexport aus intra-lysosomalen Membranen und weist Phospholipase-C-Aktivitäten auf. Verwandte Referenzen: PMID:20807762 PMID:21098024 PMID:25339683
• Moduliert stressinduzierte Apoptose durch Ceramidproduktion. Verwandte Referenzen: PMID:8706124
• Sezernierte aSMase reorganisiert die Plasmamembran durch Umwandlung von Sphingomyelin in Ceramid, und ihre Sekretion wird durch Entzündungsmediatoren und Krankheitserreger hochreguliert, was die Immunabwehr und die Pathogeninternalisierung erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:12563314 PMID:17303575 PMID:20807762 PMID:9393854
• Während bakterieller Infektionen wird die lysosomale Form extrazellulär freigesetzt und durch CASP7 gespalten, was die Reparatur der Plasmamembran fördert und GSDMD-Perforinporen entgegenwirkt. Verwandte Referenzen: PMID:21157428
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Lysosomen, Lipidtröpfchen und die Sekretion in den extrazellulären Raum.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung; das Enzym ist zinkabhängig (metallbindend).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wird gegen ein rekombinantes Fragment mit Aminosäuren 70–340 von menschlichem SMPD1 hergestellt, das Epitope innerhalb der katalytischen Domäne erkennen kann. Erwägen Sie die Validierung der Spezifität anhand von Knockout (KO)-Zelllysaten, sofern verfügbar.
• Für Western Blotting (WB) verwenden Sie reduzierende Bedingungen und erwarten Sie ein Band bei etwa 70 kDa. Lysosomale Anreicherung oder Behandlung mit Stressoren kann die Detektion verbessern.
• Für Immunfluoreszenz (IF-F) und Immunhistochemie (IHC-P) werden Permeabilisierung und Antigen-Retrieval empfohlen. Co-Färbung mit lysosomalen Markern kann die subzelluläre Lokalisation bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Teil eines passenden Paares verwendet werden; titrieren und optimieren Sie die Bedingungen für Ihr spezifisches Assay-Format.
• Kreuzreaktivität wird für Mensch und Ratte berichtet; für andere Spezies wird eine Validierung empfohlen.

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