Polyclonal Antibodies
Anti-SMPD1 / ASM polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P.17405
Artikelnummer : CM0028996
Preis variiert je nach Spezifikationen und Anpassungen
- Anwendung
- WB, IF/ICC, ELISA
- Kreuzreaktivität
- Mensch, Maus, Ratte
- Proteingewicht
- 70kDa
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Kernproduktspezifikationen und -parameter
| Parameter | Wert |
|---|---|
| Produktname | SMPD1 / ASM Kaninchen pAb |
| Bemerkungen/Alias | ASM; NPD; ASMASE; SMPD1 / ASM |
| Spezies | Mensch |
| GenID (Mensch) | 6609 |
| GenID | 6609 |
| Immunogen | Rekombinantes Fusionsprotein, das einer Sequenz entspricht, die den Aminosäuren 70-340 von humanem SMPD1 / ASM (NP_000534.3) entspricht |
| Quelle | Kaninchen |
| Kategorie | Polyklonale Antikörper |
| Anwendung | WB, IF/ICC, ELISA |
| Kreuzreaktivität | Mensch, Maus, Ratte |
| SWISS | P17405 |
| Proteingewicht | 70kDa |
| Versand | Eisbeutel |
Biologischer Hintergrund: SMPD1 / ASM Funktion und Lokalisierung
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Die saure Sphingomyelinase (aSMase), kodiert durch das SMPD1-Gen, ist eine Sphingomyelin-Phosphodiesterase, die die Umwandlung von Sphingomyelin in Ceramid katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062
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Das Enzym existiert in zwei Formen, die aus einem einzigen Vorläufer durch alternative Trafficking entstehen: eine Form zielt auf das endolysosomale Kompartiment ab, die andere wird extrazellulär freigesetzt; unter Stressbedingungen wird die lysosomale Exozytose zur Hauptquelle der sekretierten Form. Verwandte Referenzen: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211
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In Lysosomen wandelt aSMase Sphingomyelin in Ceramid um und spielt eine kritische Rolle beim Cholesterinexport aus intraendolysosomalen Membranen. Es zeigt Phospholipase-C-Aktivität gegenüber 1,2-Diacylglycerolphosphocholin und 1,2-Diacylglycerolphosphoglycerol; es moduliert auch stressinduzierte Apoptose durch Ceramidproduktion. Verwandte Referenzen: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683, PMID:8706124
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Die sekretierte Form reorganisiert die Architektur der Plasmamembran durch die Erzeugung von Ceramid und beeinflusst dadurch die Zellsignalgebung und die Abwehr des Wirts; ihre Sekretion wird durch Stress und Entzündungsmediatoren wie IL1B, IFNG und TNF hochreguliert. Verwandte Referenzen: PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854
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In verletzten Zellen wird die lysosomale Form in Abhängigkeit von Ca(2+) extrazellulär freigesetzt, was die Endozytose und die Reparatur der Plasmamembran fördert; eine durch CASP7 gespaltene Form zeigt eine verstärkte Aktivität und unterstützt die Membranreparatur weiter. Verwandte Referenzen: PMID:20530211
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Das Enzym wird von verschiedenen Pathogenen unterlaufen: bakterielle (z. B. P. aeruginosa, N. gonorrhoeae) und virale (z. B. SARS-CoV, SARS-CoV-2, Zaire-Ebolavirus) Infektionen lösen ihre Sekretion aus und erleichtern den Eintritt der Pathogene über ceramidreiche Membranplattformen.
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Mutationen in SMPD1 führen zu den Niemann-Pick-Krankheitstypen A und B, die durch Sphingomyelin-Akkumulation und Neurodegeneration gekennzeichnet sind; das Protein lokalisiert sich in Lysosomen und Lipidtropfen und wird in den extrazellulären Raum sezerniert.
Experimentelle Anleitung und technische Tipps
- Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 70-340 und deckt einen großen Teil der katalytischen Domäne ab; daher wird erwartet, dass der Antikörper sowohl die Vorläufer- als auch die reifen Formen von aSMase erkennt.
- Für Western Blotting wird eine Bande um 70 kDa erwartet; jedoch können Glykosylierung und Verarbeitung zu mehreren Formen führen, weshalb eine Validierung im entsprechenden Probensystem empfohlen wird.
- Bei Anwendungen der Immunfluoreszenz und Immunzytochemie sollte die duale Lokalisierung von aSMase (Lysosomen und sekretiert) berücksichtigt werden; eine geeignete Fixierung und Permeabilisierung wird empfohlen.
- ELISA-Anwendungen können unter Verwendung von rekombinantem aSMase als Standard optimiert werden; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen ermöglicht multispzies-Studien.
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