Anti-SMPD1 / ASM Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P17405

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SMPD1 / ASM

• SMPD1/ASM ist eine lysosomale Hydrolase, die Sphingomyelin in Ceramid umwandelt – ein Lipidmediator, der an Apoptose, Differenzierung und Zellsignalgebung beteiligt ist. Verwandte Referenzen: PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062
• Es existiert in zwei enzymatischen Formen: eine wird zum Endolysosomalen Kompartiment dirigiert, die andere wird extrazellulär freigesetzt, wobei lysosomale Exozytose die Hauptquelle der sekretorischen Form ist. Verwandte Referenzen: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211
• In Lysosomen wandelt es Sphingomyelin zu Ceramid um und spielt eine Rolle beim Cholesterinexport aus endolysosomalen Membranen; es besitzt zudem Phospholipase-C-Aktivität. Verwandte Referenzen: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683
• Sekretierte ASM reorganisiert Plasmamembran-Rafts durch die Generierung von Ceramid – dies ist entscheidend für die Wirtsverteidigung gegen Pathogene wie Pseudomonas aeruginosa. Verwandte Referenzen: PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854
• Die Spaltung durch CASP7 im extrazellulären Raum ergibt eine aktivere Form, die die Ceramidproduktion und die Reparatur der Plasmamembran während bakterieller Infektionen verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:21157428
• Die ASM-Aktivierung wird von Viren wie SARS-CoV und SARS-CoV-2 sowie Bakterien wie N. gonorrhoeae genutzt, um die Infektion zu erleichtern.
• Genetische Defekte in SMPD1 führen zur Niemann-Pick-Krankheit, einer lysosomalen Speichererkrankung, die durch die Akkumulation von Sphingomyelin gekennzeichnet ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt einen großen zentralen Bereich (AS 70–340) des menschlichen SMPD1 ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl die Vorläufer- als auch die reife Form erkennen kann. Verwenden Sie bei der Probenvorbereitung Proteaseinhibitoren, um die Integrität des Volllängenproteins zu erhalten.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 70 kDa zu erwarten. Überprüfen Sie die Spezifität mithilfe geeigneter Positivkontrollen (z. B. humane, Maus- oder Ratten-Zelllysate, die bekanntermaßen SMPD1 exprimieren) und schließen Sie Negativkontrollen ein.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC kann eine Färbung in lysosomalen Kompartimenten beobachtet werden; eine Co-Färbung mit lysosomalen Markern wird empfohlen, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte, sodass er für Studien an Nagetiermodellen verwendet werden kann – validieren Sie ihn aber immer im Kontext der entsprechenden Spezies und des Gewebes.
• ELISA-Protokolle sollten mit rekombinantem SMPD1-Protein oder geeigneten Beschichtungsantigenen optimiert werden; für Sandwich-ELISA erwägen Sie die Paarung mit passenden Nachweisantikörpern.

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