Anti-SMG1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q96Q15

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SMG1

• SMG1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die eine zentrale Rolle bei der nonsense-vermittelten mRNA-Dekay (NMD) spielt, indem sie UPF1/RENT1 phosphoryliert. Es ist Teil des SMG1C-Komplexes zusammen mit SMG8 und SMG9.
• Es wird an gestoppte Ribosomen rekrutiert, um den SURF-Komplex (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3) zu bilden, der über UPF2 mit dem Exon-Junction-Komplex (EJC) assoziiert, um die NMD auszulösen.
• Neben der NMD wirkt SMG1 auch in der Reaktion auf genotoxischen Stress, phosphoryliert p53/TP53 und trägt zur optimalen p53-Aktivierung nach DNA-Schäden bei. Seine Depletion führt zu spontanen DNA-Schäden und erhöhter Empfindlichkeit gegenüber ionisierender Strahlung.
• SMG1 ist sowohl im Kern als auch im Zytoplasma lokalisiert.
• Es ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Werten in Herz und Skelettmuskel, und ist auch in Plazenta, Gehirn, Lunge und Milz vorhanden, aber fehlt in der Leber.
• Das Protein enthält eine ATP-Bindungsdomäne und benötigt Mangan als Metall-Cofaktor. Es unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen von SMG1.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz im C-terminalen Bereich (AS 3562–3661) von humanem SMG1, unterscheidet sich von der Kinasedomäne und ermöglicht potenziell den Nachweis sowohl von vollständigen als auch von gekürzten Isoformen im Western Blot.
• Verwenden Sie für den Western Blot aufgrund der großen Proteingröße (~411 kDa) ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 % oder Gradientengel) und verlängerte Transferzeiten, um einen effizienten Transfer des hochmolekularen Proteins sicherzustellen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Mausproben, wenn Kreuzreaktivität erforderlich ist, da der Antikörper bekanntermaßen mit Maus-SMG1 kreuzreagiert.
• Erwägen Sie für ELISA die Verwendung des gleichen Peptids als positives Kontrollantigen, um die Assay-Bedingungen zu etablieren.
• Verwenden Sie in NMD- oder DNA-Schäden-Studien geeignete Kontrollen (z. B. der UPF1-Phosphorylierungsstatus), um die SMG1-Aktivität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.

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