Anti-SMARCB1/SNF5 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q12824

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SMARCB1/SNF5

• SMARCB1/SNF5, auch als BAF47, INI1 oder hSNF5 bekannt, ist eine Kernuntereinheit des ATP-abhängigen SWI/SNF-(BAF-)Chromatin-Remodelling-Komplexes, der für die Regulation der Genexpression durch das Remodelling von Nukleosomen entscheidend ist.
• Der BAF-Komplex moduliert die Chromatinstruktur, indem er Altosome erzeugt, asymmetrische Strukturen mit zwei Histon-Oktameren, und dadurch die DNA-Superhelix verändert und die Transkriptionsregulation erleichtert; SMARCB1/SNF5 stimuliert dabei die Remodelling-Aktivität von SMARCA4/BRG1.
• SMARCB1/SNF5 ist an verschiedenen zellulären Prozessen beteiligt, darunter Zellproliferation und -differenzierung, antivirale Antworten und Tumorsuppression; es erzwingt einen Zellzyklusarrest in G0/G1 und fungiert als Tumorsuppressor, der bei malignen rhabdoiden Tumoren häufig inaktiviert ist.
• Während der neuronalen Entwicklung ist SMARCB1/SNF5 sowohl Bestandteil von neuralen Vorläuferkomplexen (npBAF) als auch von neuronspezifischen Komplexen (nBAF), wobei der Austausch von Untereinheiten, beispielsweise ACTL6A/B und PHF10/DPF1/3, den Übergang von der Selbsterneuerung der Stammzellen zur postmitotischen neuronalen Differenzierung steuert.
• Das Protein ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was durch seine Funktion bei der Chromatinbindung und Transkriptionsregulation angezeigt wird.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Bildung einer Isopeptidbindung). Zudem ist bekannt, dass SMARCB1/SNF5 mit viralen Proteinen, beispielsweise der HIV-1-Integrase, interagiert, wodurch es mit Wirt-Virus-Interaktionen in Verbindung steht.
• Mutationen in SMARCB1 stehen mit dem Coffin-Siris-Syndrom (geistige Behinderung, Hypotrichose) und der Schwannomatose in Zusammenhang und unterstreichen damit seine Bedeutung für Entwicklungs- und tumorigenetische Signalwege.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen dieses Antikörpers entspricht den Aminosäuren 50–150 des humanen SMARCB1/SNF5 (NP_003064.2). Diese Region ist speziesübergreifend gut konserviert, was mit der beobachteten Reaktivität gegenüber Orthologen von Maus und Ratte übereinstimmt.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 44 kDa erwartet. Wir empfehlen, den Antikörper zu titrieren und geeignete Positivkontrollen, beispielsweise Lysate aus HeLa-, HEK293- oder Maus-/Rattenhirn, einzubeziehen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung von rekombinantem SMARCB1/SNF5-Protein oder -Peptid als Beschichtungsantigen vorteilhaft sein. Der Antikörper kann möglicherweise auch endogenes SMARCB1/SNF5 in Zelllysaten nachweisen, wobei eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen empfohlen wird.
• Zur Kontrolle der Spezifität in Immunnachweis-Assays sollte die Verwendung von Zelllinien mit verifiziertem Knockdown oder Knockout in Betracht gezogen werden.

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