Anti-SMARCAD1-Monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H4L7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SMARCAD1-Funktion und -Lokalisierung

• SMARCAD1 (SWI/SNF-related matrix-associated actin-dependent regulator of chromatin subfamily A containing DEAD/H box 1) besitzt eine intrinsische ATP-abhängige Nukleosom-Remodellierungsaktivität und ist sowohl für die DNA-Reparatur als auch für die Heterochromatin-Organisation erforderlich. Verwandte Referenzen: PMID:22960744 PMID:21820097
• Es verbindet den ATP-abhängigen Histonaustausch mit einer chaperon-ähnlichen, ATP-unabhängigen Histondeposition und Nukleosomenassembly. Verwandte Referenzen: PMID:21820097
• Fördert die DNA-End-Resektion bei Doppelstrangbrüchen (DSBs), indem es die Histon-DNA-Wechselwirkungen in flankierenden Nukleosomen schwächt. Verwandte Referenzen: PMID:22960744
• Erforderlich für die Wiederherstellung der Heterochromatin-Organisation nach der Replikation; erleichtert die Aufrechterhaltung durch die Lenkung der H3- und H4-Deacetylierung, H3K9-Trimethylierung (H3K9me3) und Wiederherstellung der Stille. Verwandte Referenzen: PMID:21549307
• Lokalisiert sich vorwiegend im Zellkern und auf den Chromosomen.
• Isoform 1 ist weit verbreitet exprimiert; Isoform 3 findet sich hauptsächlich in der Haut und der Speiseröhre. Beide Isoformen werden auf Proteinebene in Fibroblasten und Keratinozyten nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:29409814
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; das kanonische Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 117 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Aufgrund der Immunogen-Sequenz (Aminosäuren 928–1026) erkennt dieser Antikörper den C-terminalen Bereich von SMARCAD1. Für Western Blot (WB) bereiten Sie Lysate mit Standard-RIPA-Puffer auf und sondieren Bänder in der Nähe von 117 kDa sowie eine kleinere Isoform bei ~68 kDa; fügen Sie positive Kontrollen wie Fibroblasten- oder Keratinozytenextrakte hinzu.
• Für die Immunpräzipitation (IP) verwenden Sie 1–2 µg Antikörper pro 500 µg Zelllysat und validieren die Ko-Präzipitation mit bekannten Interaktionspartnern oder negativen IgG-Kontrollen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) und der Immunhistochemie (IHC-P) fixieren Sie Zellen oder Gewebeschnitte mit 4 % Paraformaldehyd und permeabilisieren mit 0,1 % Triton X-100; eine nukleäre Färbemuster wird erwartet. Optimieren Sie die Antigen-Retrieval für Paraffinschnitte.
• Für ELISA-Anwendungen beschichten Sie Platten mit rekombinanten SMARCAD1-Fragmenten oder Zell-/Gewebelysaten und führen eine Schachbrett-Titration durch, um die optimalen Antikörper- und Antigenkonzentrationen zu bestimmen.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte eignet sich der Antikörper für multispzies-Studien; überprüfen Sie jedoch die Leistungsfähigkeit in Ihrem spezifischen experimentellen System.

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