Anti-Smad3 Kaninchen monoklonaler Antikörper (KO validiert) für WB, IHC-P, ELISA - P84022

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Smad3-Funktion und -Lokalisierung

• SMAD-Familienmitglied 3 (Smad3) ist ein intrazellulärer Signaltransduktor und transkriptioneller Modulator, der durch TGF-beta (Transforming Growth Factor) und Activin-Typ-1-Rezeptorkinasen aktiviert wird.
• Es bindet an das TRE-Element im Promotorbereich vieler TGF-beta-regulierter Gene und aktiviert nach Bildung des SMAD3/SMAD4-Komplexes die Transkription. Es kann auch am AP-1/SMAD-Locus einen SMAD3/SMAD4/JUN/FOS-Komplex bilden, um die TGF-beta-vermittelte Transkription zu regulieren.
• Smad3 reguliert die Wundheilung negativ, wahrscheinlich durch Modulation des Wachstums und der Migration primärer Keratinozyten und durch Veränderung der TGF-beta-vermittelten Chemotaxis von Monozyten. Dieser Effekt scheint hormonsensitiv zu sein.
• Es dient als Regulator der Chondrogenese und Osteogenese und hemmt die frühe Heilung von Knochenfrakturen.
• Smad3 reguliert die PDPK1-Kinaseaktivität positiv, indem es dessen Dissoziation vom vom 14-3-3-Protein YWHAQ stimuliert, welches als negativer Regulator wirkt.
• Das Protein lokalisiert sich sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung. Es enthält metallbindende und DNA-bindende Domänen und nimmt an Wirt-Virus-Interaktionen teil.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100–200 von humanem Smad3 (NP_005893.1) entspricht. Bei Anwendung auf nicht-menschliche Spezies bestätigen Sie die Sequenzhomologie, um die Reaktivität sicherzustellen.
• Für Western Blot (WB) verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen und verifizieren Sie die Bande bei ca. 48 kDa; eine Knockout-Validierung wird empfohlen, um die Spezifität in Ihren Proben zu bestätigen.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen und fügen sowohl positive als auch negative Gewebekontrollen hinzu, um Färbemuster zu validieren.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie eine geeignete Capture- oder Detektionsantikörper-Kombination für Sandwich-Formate in Betracht ziehen und die Leistung unter Verwendung von rekombinantem Smad3-Protein bestätigen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde validiert; jedoch wird eine unabhängige Überprüfung in Ihrem spezifischen experimentellen System empfohlen.

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