Anti-Smad1/Smad5/Smad9 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Smad1/Smad5/Smad9 Funktion und Lokalisierung

• Transkriptioneller Modulator, beteiligt an verschiedenen zellulären Prozessen wie embryonaler Entwicklung, Zelldifferenzierung und Gewebehomöostase. Verwandte Referenzen: PMID:9335504
• Nach Bindung von BMP-Liganden wird es durch Typ-I-BMP-Rezeptoren phosphoryliert, assoziiert mit SMAD4 und translokiert in den Zellkern, um als Transkriptionsfaktor zu fungieren, der Smad-Bindungselemente (SBEs) erkennt. Verwandte Referenzen: PMID:33667543
• Teil der SMAD-Familie: Smad1, Smad5 und Smad9 sind hoch homologe Mitglieder, die hauptsächlich Bone Morphogenetic Protein (BMP)-Signalwege vermitteln.
• Subzelluläre Lokalisierung: Pendelt als Reaktion auf die BMP-Rezeptoraktivierung zwischen Zytoplasma und Zellkern.
• Posttranslational reguliert durch Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation; enthält eine Zink-bindende Motiv für DNA-Interaktion.
• Gewebespezifität: Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Konzentrationen in Herz und Skelettmuskel.
• Vermittelt auch den Abbau des CREBBP/EP300-Repressors SNIP1 und reguliert die BMP4-induzierte Expression von MSX1 positiv (By similarity).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot: Erwägen Sie die Anreicherung von Kernfraktionen, um den Nachweis von phosphoryliertem Smad1/5/9 zu verbessern, da sich diese Transkriptionsfaktoren nach BMP-Stimulation im Zellkern ansammeln.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie können je nach Aktivierungsstatus sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbemuster beobachtet werden; validieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für eine optimale Detektion.
• Für ELISA: Die polyklonale Natur dieses Antikörpers kann eine hohe Sensitivität für den Nachweis der Gesamt-Smad1/5/9-Proteinspiegel bieten; Kreuzreaktivität mit anderen Smad-Familienmitgliedern sollte jedoch im spezifischen Assaysystem getestet werden.
• Das Immunogen entspricht einer konservierten N-terminalen MH1-Domänenregion (aa 19-125), was darauf hindeutet, dass dieser Antikörper wahrscheinlich die DNA-Bindedomäne erkennt; ziehen Sie geeignete Blocking-Peptide oder Knock-out-Kontrollen zur Bestätigung der Spezifität in Betracht.

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