Monoklonaler Anti-SLC25A4/ANT1-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – P12235

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SLC25A4/ANT1

• Proteinidentität und Isoformen: SLC25A4 kodiert die Herz-/Skelettmuskel-Isoform der ADP/ATP-Translokase (ANT1), ein Mitglied der Familie der mitochondrialen Carrier. Alternative Bezeichnungen sind Adeninnukleotid-Translokator 1, ADP/ATP-Carrier-Protein 1 und Solute Carrier Family 25 Mitglied 4.
• Kernfunktion als Antiporter: Katalysiert den Austausch von mitochondrialem ATP gegen zytosolisches ADP – ein entscheidender Schritt für die zelluläre Energieversorgung. Der Carrier arbeitet nach einem alternierenden Zugangsmechanismus und wechselt zwischen zytoplasmaoffenen und matrixoffenen Zuständen, um jeweils ein Substrat zu transportieren. Verwandte Referenzen: PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• Beteiligung an der mitochondrialen Permeabilitätsübergangspore (mPTP): Nimmt an der Bildung der mitochondrialen Permeabilitätsübergangspore teil, einem unspezifischen Kanal, der die innere Mitochondrienmembran permeabilisiert und den Zelltod auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:31883789
• Protonentransporter und Thermogenese: Neben dem Nukleotidaustausch kann ANT1 als Protonentransporter fungieren und dadurch die Atmung von der ATP-Synthese entkoppeln, um Wärme zu erzeugen. Diese protonenleitende Aktivität wird durch freie Fettsäuren reguliert und durch den ADP/ATP-Austausch gehemmt, was ANT1 zu einem zentralen Regulator der Energiebilanz macht.
• Regulation der Mitophagie: Unabhängig von seiner Transportaktivität fördert ANT1 die Mitophagie durch Interaktion mit TIMM44, das die mitochondriale Präsequenz-Translokase TIM23 hemmt und PINK1 auf geschädigten Mitochondrien stabilisiert.
• Subzelluläre Lokalisierung: Befindet sich als mehrfach transmembranäres Protein ausschließlich in der inneren Mitochondrienmembran.
• Posttranslationelle Modifikationen und Schlüsselwörter: Das Protein unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und S-Nitrosylierung. UniProtKB-Annotationen heben seine Rolle bei Kardiomyopathie, progressiver externer Ophthalmoplegie und als Wirtsfaktor bei Virusinteraktionen hervor.
• Gewebespezifität: Wird in Erythrozyten sowie Herz- und Skelettmuskel exprimiert (wie der Isoformname bereits angibt).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das gegen die zentrale Region (AA 100–200) von humanem SLC25A4 gerichtet ist. Das Epitop liegt in einer konservierten Region; die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird durch Sequenzalignment gestützt. Validieren Sie die Reaktivität bei kritischen Anwendungen mit Ihrer spezifischen Modellart.
• Für das Western Blotting ist eine Hauptbande bei ~33 kDa zu erwarten. KO-validierte Kontrolllysate (z. B. HeLa oder A549) bestätigen die Spezifität und vermeiden Off-Target-Signale.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte das Färbemuster zytoplasmatisch mit mitochondrialer Verteilung sein. Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) kann die Detektion verbessern. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen.
• Der Antikörper ist für Immunpräzipitation (IP) und ELISA geeignet, was ihn vielseitig für Interaktionsstudien und quantitative Assays macht. Bei der IP sollten Sie erwägen, den Antikörper an Beads zu kreuzverknüpfen, um eine Koelution der schweren Kette bei ~55 kDa zu vermeiden.
• Beachten Sie bei funktionalen Assays, die die mitochondriale Integrität verändern, dass ANT1 die mPTP-Öffnung beeinflussen kann – daher kann die Färbung durch den zellulären Stresszustand beeinflusst werden.

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