Anti-SKP2 Poliklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13309

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SKP2

• SKP2 (S-phase kinase-associated protein 2), auch bekannt als p45, FBL1, FBXL1, ist eine substraterkennende Komponente des SCF-E3-Ubiquitinligase-Komplexes (SKP1-CUL1-F-box-Protein), die die Ubiquitinierung und proteasomale Degradation von Zielproteinen vermittelt, die an Zellzyklusprogression, Signaltransduktion und Transkription beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:9736735, PMID:11931757, PMID:12435635
• SKP2 erkennt spezifisch phosphoryliertes CDKN1B/p27kip, fördert dessen Degradation und reguliert so den G1/S-Übergang; dieser Prozess erfordert außerdem das Kofaktor CKS1.
• Es zielt auf ein breites Spektrum an Substraten ab, darunter ORC1, CDT1, RBL2, KMT2A/MLL1, CDK9, RAG2, NBN, FOXO1, UBP43, YTHDF2 und wahrscheinlich MYC, TOB1 und TAL1. Die Degradation von TAL1 erfordert die Zusammenarbeit mit der E3-Ligase STUB1. Verwandte Referenzen: PMID:11931757, PMID:12435635, PMID:12769844, PMID:17962192
• In Komplex mit Cyclin E (CCNE1 oder CCNE2) und CDK2 erkennt SKP2 CDKN1A/p21 und fördert dessen Ubiquitinierung. Verwandte Referenzen: PMID:9736735, PMID:16262255
• Nach DNA-Schäden vermittelt phosphoryliertes SKP2 die Lys-63-verknüpfte Ubiquitinierung von NBN, erleichtert die Rekrutierung von ATM und fördert die homologe Rekombinationsreparatur. Verwandte Referenzen: PMID:22464731
• SKP2 fördert außerdem die CK1-abhängige Ubiquitinierung und Degradation von CDH1 zur Regulation der Zellmigration und zeigt antivirale Aktivität, indem es das NS5A-Protein des Hepatitis-C-Virus zur proteasomalen Degradation targeting. Verwandte Referenzen: PMID:22770219
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Kern und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung; es enthält die für F-box-Proteine charakteristischen leucinreichen Wiederholungen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 100–200 von humanem SKP2; überprüfen Sie, ob diese Region für den Nachweis des Ziels in Ihrer spezifischen Anwendung und Probenart ausreichend ist.
• Für Western Blot empfehlen sich als Startverdünnung Bereich 1:500–1:2000, optimieren Sie die Verdünnung je nach Expressionslevel in Ihrem Modell. Eine Bande in der Nähe von 48 kDa ist zu erwarten.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC schließen Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte ein, um SKP2 sowohl in zytoplasmatischen als auch in nukleären Kompartimenten nachzuweisen.
• Für ELISA überprüfen Sie die Kompatibilität mit Ihrem Beschichtungspuffer und Detektionssystem und erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers als Capture- oder Detektionsreagenz nach einer Paarvalidierung.
• Dieser Antikörper wurde gegen humanes SKP2 hergestellt; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt. Validieren Sie die Spezifität, wenn Sie ihn mit nicht-menschlichen Proben verwenden.

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