Monoklonaler Anti-SKP2-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q13309

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SKP2

• SKP2 (S-Phase-Kinase-assoziiertes Protein 2) ist ein F-Box-Protein, das als Substraterkennungseinheit des SCF-E3-Ubiquitin-Ligasekomplexes (SKP1-CUL1-F-Box-Protein) fungiert. Es markiert wichtige Zellzyklusregulatoren wie CDKN1B/p27 und CDKN1A zur Ubiquitinierung und zum proteasomalen Abbau und fördert dadurch den G1/S-Übergang (PubMed:9736735, PubMed:11931757, PubMed:12435635). Zugehörige Referenzen: PMID:9736735, PMID:11931757, PMID:12435635
• Über die Kontrolle des Zellzyklus hinaus vermittelt SKP2 die Ubiquitinierung verschiedener Substrate, darunter CDT1, ORC1, FOXO1, MYC und CDH1, und beeinflusst dadurch DNA-Replikation, Apoptose, Transkription und Zellmigration (PubMed:12769844, PubMed:22770219). Zugehörige Referenzen: PMID:12769844, PMID:22770219
• Als Reaktion auf DNA-Schäden katalysiert phosphoryliertes SKP2 die Lys-63-verknüpfte Ubiquitinierung von NBN und erleichtert dadurch die Rekrutierung von ATM sowie die Reparatur durch homologe Rekombination (PubMed:22464731). Zugehörige Referenzen: PMID:22464731
• SKP2 besitzt außerdem antivirale Aktivität, indem es das Nichtstrukturprotein 5A des Hepatitis-C-Virus zum proteasomalen Abbau markiert, wodurch es mit der angeborenen Immunität verknüpft ist.
• SKP2 ist sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Stabilität und Funktion regulieren.
• SKP2 gehört zur F-Box/LRR-Repeat-Proteinfamilie (FBXL1) und ist in verschiedenen Krebsarten häufig überexprimiert, wodurch es zu einem potenziellen diagnostischen und therapeutischen Ziel wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (AS 1–100) des humanen SKP2 erzeugt. Beim Western Blot ist in Lysaten humaner Zellen eine Bande bei etwa 48 kDa zu erwarten. Verwenden Sie ein reduzierendes Gel und validieren Sie das Ergebnis mit einer Positivkontrolle wie HeLa- oder 293T-Zellen.
• Für die Immunhistochemie (paraffineingebettetes Gewebe) müssen Methoden zur Antigenretrieval und die Antikörperverdünnung optimiert werden. Schließen Sie geeignete Gewebekontrollen ein, von denen bekannt ist, dass sie SKP2 exprimieren (z. B. Tonsille oder Brustkarzinom).
• Verwenden Sie den rekombinanten Antikörper bei ELISA-Anwendungen als Capture- oder Detektionsreagenz in Kombination mit validiertem Antigen oder passenden Antikörperpaaren. Bestätigen Sie die Leistung mit rekombinantem SKP2-Protein.
• Eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht berichtet; dieses Produkt ist für humane Proben bestimmt. Forschende sollten die Spezifität in ihrem Modellsystem unabhängig überprüfen.

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