Anti-SIVA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O15304

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SIVA1-Funktion und -Lokalisierung

• SIVA1 kodiert das Apoptose-regulatorische Protein Siva, auch bekannt als CD27-bindendes Protein (CD27BP), das eine kritische Rolle bei der CD27-vermittelten Apoptose spielt (UniProt: O15304).
• Das Protein hemmt die anti-apoptotische Aktivität des BCL2L1-Isoforms Bcl-x(L) und fördert somit Zelltodwege (UniProt: O15304).
• Siva unterdrückt die NF-kappa-B-Aktivierung und verstärkt die T-Zell-Rezeptor-vermittelte Apoptose, was auf eine Rolle bei der Immunregulation hindeutet (UniProt: O15304).
• Durch alternatives Spleißen werden mehrere Isoformen produziert, darunter Siva-1 und Siva-2, die unterschiedliche funktionelle Eigenschaften haben können (UniProt: O15304 keywords).
• Siva lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was auf eine Doppelrolle bei zytoplasmatischer Signalübertragung und nukleären Ereignissen hindeutet (UniProt: O15304).
• Das Protein enthält eine Zink-bindende Domäne und wird als metallbindendes Phosphoprotein klassifiziert, mit potenzieller Beteiligung an Wirt-Virus-Interaktionen und pharmazeutischer Zielsetzung (UniProt: O15304 keywords).
• SIVA1 ist ubiquitär exprimiert, mit höheren Spiegeln in Thymus, Hoden, Eierstock, Prostata, Dünndarm und Milz und niedrigeren Spiegeln im Dickdarm (UniProt: O15304).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-110 abdeckt und die N-terminale Region einschließt; diese Region ist bekannt dafür, funktionelle Domänen zu enthalten, die für die Apoptose-Induktion und Proteinwechselwirkungen wichtig sind. Zum Nachweis von volllängem SIVA1 (~19 kDa) sollten Sie Zelllysate aus Geweben mit hoher Expression wie Thymus oder Hoden in Betracht ziehen.
• Im Western Blot (WB) erkennt der Antikörper eine Bande um 19 kDa; aufgrund des alternativen Spleißens können jedoch mehrere Isoformen (z. B. Siva-1 und Siva-2) vorhanden sein, was zu potenziell mehreren Banden führen kann. Validieren Sie dies in Ihrem relevanten Probensystem.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden den Nachweis beeinflussen; erwägen Sie die Verwendung von Citratpuffer mit hitzeinduzierter Epitop-Retrieval und testen Sie an positiven Kontrollgeweben wie Milz oder Thymus.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; die Paarung mit einem anderen SIVA1-Antikörper kann die Empfindlichkeit verbessern. Validieren Sie die Assay-Bedingungen empirisch.
• Eine Kreuzreaktivität mit Human und Maus wurde berichtet; für andere Spezies führen Sie vor der experimentellen Verwendung eine Sequenzalignment durch, um die Homologie zu bewerten.

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