Monoklonaler Anti-Sin3A-Antikörper für WB, ELISA – Q96ST3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Sin3A

• Sin3A (Protein Sin3a mit gepaarten amphipathischen Helices) ist eine Kernkomponente des Histon-Deacetylase-(HDAC-)Komplexes und fungiert als transkriptioneller Korepressor.
• Es interagiert direkt mit verschiedenen Transkriptionsfaktoren wie REST, MXI1 und MXD1-MAX-Heterodimeren, um MYC-responsive Gene zu reprimieren und onkogene Aktivitäten von MYC entgegenzuwirken.
• Sin3A ist an der Regulation zirkadianer Rhythmen beteiligt, indem es in Zusammenarbeit mit dem großen PER-Komplex die transkriptionelle Repression zirkadianer Zielgene (z. B. PER1) durch Histon-Deacetylierung vermittelt.
• Wie der Name bereits andeutet, enthält Sin3A Domänen mit gepaarten amphipathischen Helices, die Interaktionen mit mehreren Transkriptionsfaktoren und Korepressoren ermöglichen.
• Es befindet sich hauptsächlich im Zellkern und im Nukleolus, was mit seiner Rolle bei der Transkriptionsregulation übereinstimmt.
• Gewebespezifische Expression: Sin3A wird im sich entwickelnden Gehirn stark exprimiert, insbesondere in der Ventrikelzone verschiedener kortikaler Regionen, wo es für die Differenzierung kortikaler Neuronen und die Verlängerung kommissuraler Axone erforderlich ist.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen zählen Acetylierung, Phosphorylierung und eine ubiquitinähnliche Konjugation (Isopeptidbindung), was auf mehrere Regulationsebenen hinweist.
• Mutationen oder Fehlfunktionen von SIN3A stehen mit krankheitsassoziierten Varianten in Zusammenhang, darunter geistige Behinderung und Kleinwuchs (WITKOS-Syndrom).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) des humanen Sin3A entspricht. Diese Region kann an Protein-Protein-Interaktionen beteiligt sein; eine mögliche Epitopmaskierung in nativen Komplexen sollte berücksichtigt werden.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von Sin3A etwa 145 kDa. Achten Sie auf geeignete Gelelektrophoresebedingungen für Proteine mit hohem Molekulargewicht und validieren Sie den Antikörper mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen im relevanten Probensystem.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte eine Titration des Antikörpers gegen das Immunogenpeptid oder rekombinantes Sin3A-Protein in Betracht gezogen werden, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen. Führen Sie wie angegeben Kreuzreaktivitätstests mit Lysaten aus humanen und murinen Geweben durch.
• Angesichts der Rolle von Sin3A bei der Transkriptionsregulation und dem Chromatin-Remodelling kann dieser Antikörper für die Untersuchung von Proteininteraktionen (z. B. Co-IP) nützlich sein. Solche Anwendungen wurden jedoch nicht validiert; eine unabhängige Validierung wird empfohlen.

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