Anti-SIK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P57059

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SIK1-Funktion und -Lokalisation

• SIK1 (auch bekannt als MSK, SNF1LK oder Salt-inducible kinase 1) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die Downstream-Ziele wie HDAC4, HDAC5, PPME1, SREBF1 und CRTC1/TORC1 phosphoryliert.
• Sie reguliert die hepatische Gluconeogenese und Lipogenese durch Phosphorylierung und Hemmung der CREB-Cofaktoren CRTC1/TORC1 und CRTC2/TORC2 sowie von SREBF1 und unterdrückt dadurch die CREB-vermittelte Transkription als Reaktion auf cAMP-Signale. Verwandte Referenzen: PMID:29211348
• SIK1 ist durch Phosphorylierung der Histon-Deacetylasen der Klasse II, HDAC4 und HDAC5, an der Muskelzell-Differenzierung und Kardiomyogenese beteiligt, was zur Aktivierung von MEF2-Zielgenen und zur Regulation des Zellzyklus-Austritts führt.
• Sie ist an der Regulation zirkadianer Rhythmen beteiligt, indem sie die PER1-Induktion als Reaktion auf Licht über CRTC1/TORC1-Phosphorylierung abschwächt.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst sowohl Zytoplasma als auch Zellkern, was mit ihrer Rolle beim Shuttling und der Phosphorylierung nukleärer und zytoplasmatischer Ziele übereinstimmt.
• SIK1 enthält eine ATP-Bindungsdomäne und benötigt Magnesium als Cofaktor für ihre Kinaseaktivität; sie wird als Transferase und als Mitglied der Serin/Threonin-Proteinkinase-Familie klassifiziert.
• Das Protein ist mit Schlüsselwörtern wie Biologische Rhythmen, Zellzyklus, Tumorsuppressor und Krankheitsvariante (DEE30, Epilepsie) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1-100 von humanem SIK1 (NP_775490.2) und zielt auf die N-terminale Region ab; dies kann den Nachweis von SIK1 in voller Länge und seiner Isoformen ermöglichen.
• Für den Western Blot ist eine Bande bei etwa 85 kDa zu erwarten; die Spezifität sollte mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen, wie z.B. SIK1-überexprimierenden oder Knockout-Zelllysaten, validiert werden.
• Die Kreuzreaktivität mit murinem SIK1 wurde bestätigt; bei Bedarf sollte eine Sequenzalignment zur Bewertung der Reaktivität mit anderen Spezies in Betracht gezogen werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten die optimalen Konzentrationen für Beschichtungs- und Detektionsantikörper empirisch unter Verwendung des relevanten Analyten und der Probenmatrix bestimmt werden.
• Angesichts der Rolle von SIK1 in mehreren Signalwegen sollten während der Probenvorbereitung spezifische Phosphatase-Inhibitoren verwendet werden, um die Phosphorylierungszustände zu erhalten.

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