Anti-SHP2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA – Q06124

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SHP2

• SHP2, kodiert durch das PTPN11-Gen, ist eine nicht-Rezeptor-Tyrosinproteinphosphatase, auch bekannt als PTP-1D, SH-PTP2, und assoziiert mit dem Noonan-Syndrom (NS1) und der juvenilen myelomonozytären Leukämie (JMML).
• Wirkt downstream von verschiedenen Rezeptor- und zytoplasmatischen Proteintyrosinkinasen, spielt eine zentrale Rolle bei der Signaltransduktion von der Zelloberfläche zum Kern und reguliert die MAPK-Signalkaskade positiv. Verwandte Referenzen: PMID:10655584 PMID:14739280 PMID:18559669 PMID:28074573
• Dephosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten einschließlich GAB1, ARHGAP35, EGFR, ROCK2, CDC73, SOX9 und NEDD9/CAS-L und reguliert dadurch vielfältige Prozesse wie RhoA-Aktivierung, Ossifikation und Zelladhäsion. Verwandte Referenzen: PMID:28074573 PMID:18559669 PMID:26742426 PMID:19275884
• Funktioniert als Effektor von PDCD1 (PD-1) in T-Zellen, indem es nach Rekrutierung an phosphoryliertes PDCD1 Schlüsselmoleküle der proximalen T-Zellrezeptor(TZR)-Signalgebung dephosphoryliert, was zur Hemmung der T-Zellantwort führt. Verwandte Referenzen: PMID:32184441
• Lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was mit seiner Rolle bei der Übertragung extrazellulärer Signale auf die Transkriptionsmaschinerie übereinstimmt.
• Ist in allen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Spiegeln in Herz, Gehirn und Skelettmuskel – was seine Bedeutung in vielfältigen physiologischen Kontexten verdeutlicht.
• Enthält zwei N-terminale SH2-Domänen und eine C-terminale Tyrosinphosphatase-Domäne und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 502–593 im C-terminalen Bereich von menschlichem SHP2, was die Erkennung der wichtigsten Isoformen und Spleißvarianten unterstützen kann.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 68 kDa in menschlichen Zelllinien wie HeLa oder HEK293 zu erwarten; allerdings können endogene Expressionslevel und posttranslationale Modifikationen die Detektion beeinflussen, titrieren Sie den Antikörper daher empirisch.
• Bei Immunopräzipitation (IP) und ELISA optimieren Sie die Pufferbedingungen und Blockierungsschritte, um die Antigen-Antikörper-Bindung aufrechtzuerhalten.
• Aufgrund der Reaktivität gegen Mensch validieren Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem, wenn andere Spezies getestet werden sollen.
• Verwenden Sie geeignete Kontrollen (z. B. Phosphataseinhibitoren) bei der Untersuchung phosphorylierungsabhängiger Interaktionen oder aktivitätsabhängiger Lokalisation.

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