Anti-SHC4 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q6S5L8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SHC4

• Das SHC-transformierende Protein 4 (SHC4), auch bekannt als RaLP oder hShcD, ist ein Mitglied der Familie der SHC-Adapterproteine. Es verfügt über eine SH2-Domäne und eine Phosphotyrosin-bindende Domäne, die Wechselwirkungen mit aktivierten Rezeptor-Tyrosinkinasen und nachgeschalteten Effektoren vermittelt.
• SHC4 aktiviert sowohl Ras-abhängige als auch Ras-unabhängige Migrationswege in Melanomen und trägt so zur Tumorzellinvasion und Metastasierung bei.
• Es ist an den frühen Phasen der agrininduzierten Tyrosinphosphorylierung von CHRNB1 (Acetylcholinrezeptor β1-Untereinheit) an der postsynaptischen Membran beteiligt und verbindet Signale der extrazellulären Matrix mit der Synapsenrezeptor-Clusterdung.
• SHC4 lokalisiert an der postsynaptischen Zellmembran, was mit seiner Rolle bei der synaptischen Signalübertragung und der Melanommigration übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist stark eingeschränkt: SHC4 wird nur in Melanomen exprimiert, mit schwacher Expression in normalen Melanozyten und benignen Nävi. Seine Expression steigt stark beim Übergang von der radialen zur vertikalen Wachstumsphase und in metastasierenden Melanomen an, was mit dem Erwerb von Migrations- und Invasionsfähigkeit korreliert.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen und wird durch Phosphorylierung reguliert, wodurch seine Adapterfunktionen moduliert werden.
• Das Molekulargewicht von SHC4 beträgt ungefähr 69 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen, das rekombinante N-terminale Fragment (Aa 1-185), kann mehrere durch alternatives Spleißen entstandene SHC4-Isoformen erkennen. Verwenden Sie eine Leiter für den gesamten Molekulargewichtsbereich, um die Hauptbanden zu identifizieren.
• Für den Western Blot ist bei Melanomzelllinien eine deutliche Bande nahe 69 kDa zu erwarten; Aufgrund der eingeschränkten Expression validieren Sie die Antikörperspezifität mit positiven und negativen Kontrollproben.
• Bei Immunfluoreszenz oder ICC ist mit einer Membran- oder Synapsenlokalisierung zu rechnen; eine Co-Färbung mit Membranmarkern kann die Spezifität bestätigen.
• Die beschriebene Kreuzreaktivität mit Maus deutet auf eine Verwendbarkeit in murine Modellen hin, dennoch sollte die Homologie überprüft werden; testen Sie die Reaktivität in Ihrem Probensystem.
• ELISA-Assays können eine sorgfältige Titration des Beschichtungsantigens und der Antikörperkonzentration erfordern; erwägen Sie das indirekte ELISA-Format für den Nachweis.
• Für alle Anwendungen bestätigen Sie die Bandenspezifität und das Signal-Rausch-Verhältnis mit geeigneten Blockierungs- und Waschbedingungen; nicht optimale Ergebnisse können eine Antikörpertitration oder Antigen-Retrieval-Schritte erfordern.

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