Anti-SF3B1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75533

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SF3B1-Funktion und -Lokalisierung

• SF3B1, auch bekannt als SAP155, SF3b155 und PRPF10, ist eine Kernkomponente des 17S U2 snRNP-Komplexes des Hauptspliceosoms, der die Entfernung von Introns aus prä-mRNAs katalysiert (PubMed:12234937, PubMed:27720643, PubMed:32494006).
  Verwandte Referenzen: PMID:12234937, PMID:27720643, PMID:32494006
• Innerhalb des U2 snRNP ist SF3B1 Teil des SF3B-Unterkomplexes, der für die Assemblierung des „A“-Komplexes und die stabile Bindung an die Branchpoint-Sequenz unerlässlich ist (PubMed:12234937, PubMed:36104565).
  Verwandte Referenzen: PMID:12234937, PMID:36104565
• SF3B1 erkennt direkt die Branch-Site-Adenosin, das Nukleophil für den ersten Schritt des Splicings, und gewährleistet so eine genaue Spleißstellen-Auswahl (PubMed:32494006, PubMed:34822310, PubMed:36104565).
  Verwandte Referenzen: PMID:32494006, PMID:34822310, PMID:36104565
• Die SF3A- und SF3B-Unterkomplexe verankern zusammen mit SF3B1 das U2 snRNP durch sequenzunabhängige Bindung stromaufwärts der Branch-Site an die prä-mRNA (PubMed:12234937).
  Verwandte Referenzen: PMID:12234937
• SF3B1 ist auch eine Komponente des minor spliceosome, das die seltenen U12-typen Introns verarbeitet (PubMed:15146077, PubMed:33509932).
  Verwandte Referenzen: PMID:15146077, PMID:33509932
• Zusammen mit anderen U2 snRNP-Komponenten kann SF3B1 an der selektiven Verarbeitung von microRNAs aus primären Transkripten beteiligt sein, wie z. B. pri-miR-17-92 (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• SF3B1 lokalisiert überwiegend im Zellkern und in den Kernspeckles, und seine Aktivität wird durch mehrere posttranslationale Modifikationen reguliert, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 144 Aminosäuren von menschlichem SF3B1; daher erkennt der Antikörper hauptsächlich Epitope innerhalb dieses Bereichs. Berücksichtigen Sie die Epitop-Zugänglichkeit unter denaturierenden vs. nativen Bedingungen bei der Planung von Experimenten.
• Für Western Blot (WB) wandert SF3B1 bei ca. 146 kDa; sorgen Sie für einen angemessenen Gel-Prozentsatz und optimale Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) werden Kern- und Kernspeckle-Färbemuster erwartet; optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung, um die Antigenität zu erhalten.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch, Maus und Ratte berichtet; überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem, wenn Sie mit anderen Spezies oder Geweben arbeiten.
• ELISA-Anwendungen können eine sorgfältige Titrierung sowohl der Capture- als auch der Detektionsantikörper erfordern, wenn sie in Sandwich-Formaten verwendet werden; dieser polyklonale Antikörper kann als Detektionsreagenz geeignet sein.

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