Anti-SF3B1 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75533

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SF3B1-Funktion und Lokalisierung

• SF3B1 kodiert für die Spleißfaktor-3B-Untereinheit 1, auch bekannt als SF3b155, SAP 155 und Prp10, die 155 kDa-Untereinheit des SF3B-Komplexes innerhalb des U2-snRNP-Spleißosoms. Verwandte Referenzen: PMID:12234937, PMID:27720643, PMID:32494006
• Es ist direkt an der frühen Spleißosom-Assemblierung beteiligt und vermittelt die Erkennung der Intron-Branch-Stelle, indem es die Auswahl des Branch-Point-Adenosins, des Nukleophils für den ersten Schritt des Spleißens, fördert. Verwandte Referenzen: PMID:32494006, PMID:34822310, PMID:36104565
• Als Teil des SF3B-Subkomplexes wird SF3B1 für die Bildung des präspleißosomalen 'A'-Komplexes durch stabile Bindung von U2 snRNP an die Branchpoint-Sequenz benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:12234937, PMID:36104565
• SF3B1 bindet zusammen mit SF3A stromaufwärts der Branch-Stelle auf sequenzunabhängige Weise und verankert so das U2 snRNP an der prä-mRNA. Verwandte Referenzen: PMID:12234937
• Das Protein trägt auch zur Assemblierung des 'E'-Komplexes bei und funktioniert innerhalb des Minor-Spleißosoms, das U12-Typ-Introns verarbeitet. Verwandte Referenzen: PMID:10882114, PMID:15146077, PMID:33509932
• SF3B1 lokalisiert im Zellkern und konzentriert sich in nukleären Speckles, subnukleären Domänen, die mit Spleißfaktoren angereichert sind.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Citrullinierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, deuten auf mehrere Ebenen der regulatorischen Kontrolle über seine Spleißaktivität hin.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das auf die Aminosäuren 1–100 von humanem SF3B1 abgebildet ist; der Antikörper erkennt möglicherweise die N-terminale Region und wird voraussichtlich mit dem vollständigen ~146 kDa-Protein reagieren.
• Für Western-Blot-Anwendungen sollte die Verwendung eines Gels mit niedrigem SDS-PAGE-Prozentanteil in Betracht gezogen und die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine optimiert werden. Passende Molekulargewichtsmarker einschließen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist ein überwiegend nukleäres Färbemuster mit gesprenkelter Anreicherung zu erwarten; Fixierungs- und Antigen-Retrieval-Protokolle sollten in Ihrem Gewebe- oder Zellsystem validiert werden.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen deutet auf eine hohe Sequenzerhaltung in der Immunogenregion hin; eine individuelle experimentelle Überprüfung wird jedoch empfohlen.
• Die ELISA-Leistung sollte unter Verwendung des rekombinanten Proteins oder Peptids, das der Immunogenregion entspricht, als positive Kontrolle validiert werden.

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