Anti-SF3A3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q12874

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SF3A3

• SF3A3 (Splicing Factor 3A Untereinheit 3), auch bekannt als SF3a60, SAP61, PRP9 oder PRPF9, ist eine 59 kDa große Komponente der SF3A-Untereinheit innerhalb des U2-Kleinkern-Ribonukleoproteins (snRNP) des Spleißosoms (UniProt Q12874).

• Es spielt eine zentrale Rolle beim prä-mRNA-Spleißen als Teil des 17S U2-snRNP-Komplexes, das direkt an der frühen Assemblierung des Spleißosoms beteiligt ist, indem es die Intron-Verzweigungsstelle erkennt und die Auswahl der Verzweigungsstellen-Adenosin fördert – das Nukleophil für den ersten Umesterungsschritt. Zugehörige Referenzen: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:32494006

• SF3A3 trägt zur Bildung des prä-Spleißosom-E-Komplexes und des prä-katalytischen Spleißosom-A-Komplexes bei und bleibt auch während der Bildung der prä-katalytischen Spleißosom-B-Komplexe assoziiert. Zugehörige Referenzen: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:29360106, PMID:30315277

• Subzellulär ist SF3A3 in nuklearen Speckles und im Nukleoplasma lokalisiert – was mit seiner Rolle bei der Speicherung von Spleißfaktoren und aktiven Transkriptionsstellen übereinstimmt.

• Das Protein wird ubiquitär in allen Geweben exprimiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, wie durch Proteomikstudien nachgewiesen wurde.

• SF3A3 enthält Zinkfingerdomänen und koordiniert Zinkionen, was auf metallbindende Funktionen hindeutet, die die Proteinstruktur stabilisieren oder Interaktionen innerhalb des Spleißosoms vermitteln können.

• Der SF3A-Komplex, bestehend aus SF3A1, SF3A2 und SF3A3, ist essenziell für die Rekrutierung von U2 snRNP und die stabile Assoziation mit prä-mRNA; Mängel an SF3A3 stören die Spleißgenauigkeit und können zu aberranten Transkripten führen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das dem N-terminalen Bereich (Aa 1-100) von menschlichem SF3A3 entspricht. Für das Western Blotting ist eine spezifische Bande bei etwa 59 kDa zu erwarten; wir empfehlen die Verwendung von Kernextrakten oder Ganzzelllysaten aus menschlichen (z. B. HeLa, HEK293) oder murinen Zelllinien. Eine Vorvalidierung des Antikörpers im relevanten Probensystem wird empfohlen.

• Für ELISA-Anwendungen kann das Peptid-Immunogen als Beschichtungsantigen verwendet werden; die Detektion von nativem SF3A3 in komplexen Proben erfordert jedoch möglicherweise eine Optimierung. Erwägen Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper, der auf ein nicht überlappendes Epitop targetiert.

• Kreuzreaktivität wurde für Mensch und Maus nachgewiesen; bestätigen Sie die Reaktivität bei anderen Spezies bei Bedarf, da die Sequenzhomologie variiert.

• Verwenden Sie geeignete Negativkontrollen (z. B. siRNA-Knockdown), um die Spezifität in Ihrem experimentellen Kontext zu überprüfen.

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