Anti-SETDB1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (KO-validiert) für WB, IF-P, ELISA - Q15047

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SETDB1-Funktion und -Lokalisierung

• SETDB1, auch bekannt als ESET oder KMT1E, ist eine Histone-Lysin-N-Methyltransferase, die spezifisch Lysin 9 von Histon H3 (H3K9me3) trimethyliert, ein Kennzeichen der transkriptionellen Repression. Verwandte Referenzen: PMID:11959841, PMID:12869583, PMID:14536086
• Sie funktioniert hauptsächlich im Euchromatin, um Gene zum Schweigen zu bringen, indem sie H3K9me3 durch Wechselwirkungen mit MBD1 und ATF7IP mit DNA-Methylierung verknüpft, und diese Repression wird während der DNA-Replikation über CAF-1 vererbbar aufrechterhalten. Verwandte Referenzen: PMID:12869583, PMID:14536086, PMID:27237050
• SETDB1 wird von TRIM28/KAP1 an Chromatin rekrutiert, das von KRAB-Zinkfingerproteinen geleitet wird, und ist für die HUSH-vermittelte Heterochromatin-Bildung und Gen-Silencing unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:24623306, PMID:27732843
• In embryonalen Stammzellen erhält SETDB1 die Repression von Genen und endogenen Retroviren aufrecht und arbeitet mit TRIM28 für die H3K9me3-Ablagerung unabhängig von der DNA-Methylierung zusammen. Verwandte Referenzen: PMID:24623306, PMID:37938770
• SETDB1 katalysiert auch Mono- und Dimethylierung von H3K9 im Zytoplasma an freien Histonen vor der Chromatin-Assemblierung. Verwandte Referenzen: PMID:26405197
• Sie lokalisiert sich vorwiegend im Zellkern, findet sich aber auch im Zytoplasma und assoziiert mit Chromosomen.
• Eine alternativ gespleißte Isoform fehlen wichtige Methyltransferase-Domänen, und sie ist katalytisch inaktiv.
• Weit verbreitet exprimiert mit höchsten Spiegeln in den Hoden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–397); der Antikörper kann das全长-SETDB1-Protein (~143 kDa) und möglicherweise N-terminale Fragmente erkennen.
• KO-Validierung deutet auf eine hohe Spezifität hin; Forscher sollten Knockout- oder Knockdown-Kontrollen in ihren experimentellen Aufbau einbeziehen, um die Spezifität in ihren eigenen Systemen zu bestätigen.
• Für Western Blotting verwenden Sie einen Bereich für Hochmolekulargewichtsmarker und berücksichtigen lange Transferzeiten oder Gele mit niedrigem Prozentsatz für das 143 kDa Protein.
• Für Immunfluoreszenz/IF-P optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um nukleären/chromosomalen SETDB1 nachzuweisen.
• In ELISA überprüfen Sie die Kreuzreaktivität, wenn Sie andere Arten als Mensch, Maus oder Ratte verwenden.

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