Anti-SETD3 polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q86TU7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SETD3-Funktion und -Lokalisierung

• SETD3, auch bekannt als hSETD3 oder C14orf154, ist ein SET-Domänen-enthaltendes Protein 3, das durch das SETD3-Gen kodiert wird.
• SETD3 ist eine Actin-Histidin-N-Methyltransferase, die spezifisch Actin an Histidin-73 (His-73) methyliert, um 3-Methylhistidin (Tele-Methylhistidin) zu bilden. Diese Aktivität ist entscheidend für eine korrekte Actin-Dynamik. Verwandte Referenzen: PMID:30526847, PMID:30626964, PMID:30785395
• Die Histidin-Methylierung von Actin durch SETD3 ist für die Kontraktion der glatten Muskulatur erforderlich, insbesondere in der arbeitenden Gebärmutter während der Entbindung, was seine Rolle in physiologischen Prozessen unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:30626964
• Das Enzym zeigt eine strikte Substratspezifität; es besitzt keine Protein-Lysin-N-Methyltransferase-Aktivität und methyliert wahrscheinlich nur Actin an His-73, was seine einzigartige funktionelle Nische unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:30626964, PMID:30785395, PMID:31388018
• SETD3 lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was auf mögliche kompartimentspezifische Funktionen jenseits der Actin-Methylierung hindeutet.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation und enthält eine SET-Domäne, die S-Adenosyl-L-Methionin bindet, den Methyldonor für seine Transferase-Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 72–329 von humanem SETD3 umspannt. Diese Region deckt den N-terminalen Teil und einen Teil der SET-Domäne ab; daher wird erwartet, dass der Antikörper die vollständige Länge von SETD3 (vorhergesagtes Molekulargewicht ~67 kDa) erkennt.
• Für Western Blotting (WB) ist es ratsam, geeignete positive und negative Kontrolllysate (z. B. SETD3-exprimierende vs. Knockdown-Zelllinien) zu verwenden, um die Spezifität zu bestätigen. Die Detektion einer Bande bei ~67 kDa in humanen Proben ist zu erwarten.
• Bei Immunpräzipitations-Assays (IP) müssen Antikörperkonzentration und Inkubationszeit möglicherweise optimiert werden; ein Standard-Startpunkt sind 1–2 µg pro 500 µg Lysat.
• Führen Sie bei der Durchführung von ELISA in Betracht, rekombinantes SETD3-Protein oder Peptidfragmente als Beschichtungsantigene zu verwenden und titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-zu-Rausch-Verhältnis.
• Da die Kreuzreaktivität für human angegeben ist, sollte eine Validierung in anderen Spezies bei Bedarf unabhängig durchgeführt werden.

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