Anti-SERCA2/ATP2A2-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, IHC-P - P16615

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SERCA2/ATP2A2

• Die sarkoplasmatische/endoplasmatische Retikulum-Kalzium-ATPase 2 (SERCA2), auch als Kalziumpumpe 2 bekannt, wird vom ATP2A2-Gen kodiert und gehört zur Familie der P-Typ-Kationen-Transport-ATPasen. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit gewebespezifischer Expression.
• SERCA2 ist ein magnesiumabhängiges Enzym, das die ATP-Hydrolyse gekoppelt an die Translokation von Kalziumionen aus dem Zytosol in das Lumen des sarkoplasmatischen oder endoplasmatischen Retikulums katalysiert und für die intrazelluläre Kalziumhomöostase essenziell ist. Verwandte Referenzen: PMID:12542527 PMID:16402920
• Diese Pumpe spielt eine zentrale Rolle im Kontraktions-/Relaxationszyklus von Muskelzellen, indem sie die Wiederaufnahme von Kalzium in das sarkoplasmatische Retikulum reguliert.
• Über die Muskelfunktion hinaus ist SERCA2 an der Autophagie beteiligt: Durch die Interaktion mit VMP1 steuert es die für die Autophagosomenbildung erforderlichen Kontakte zwischen ER-Isolationsmembranen und moduliert Kontakte mit Lipidtröpfchen, Mitochondrien und Endosomen. Verwandte Referenzen: PMID:28890335
• In Osteoklasten wirkt SERCA2 als Regulator der durch TNFSF11 vermittelten Kalziumsignalübertragung, indem es mit TMEM64 interagiert und dadurch die Aktivierung von NFATC1 sowie die Erzeugung mitochondrialer reaktiver Sauerstoffspezies fördert, die für die Osteoklastendifferenzierung entscheidend sind.
• Auf subzellulärer Ebene ist SERCA2 in der Membran des endoplasmatischen Retikulums und der Membran des sarkoplasmatischen Retikulums lokalisiert, was seine Rolle bei der intrazellulären Kalziumspeicherung und Signalübertragung widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression variiert: Isoform 1 wird in glatter Muskulatur und Nichtmuskelgeweben weit verbreitet exprimiert, mit hoher Expression in Leber, Pankreas und Lunge, während Isoformen 2 und 3 überwiegend in Herzmuskel und langsam zuckender Skelettmuskulatur vorkommen.
• Zu den wichtigen posttranslationalen Modifikationen gehören Nukleotidbindung, Phosphorylierung und Disulfidbindungen; außerdem unterliegt das Protein einer Nitrierung, wie durch mehrere phosphoproteomische Studien angezeigt wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser polyklonale Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fragment entwickelt, das die Aminosäuren 111–253 des humanen SERCA2/ATP2A2 (konservierte Region) umfasst. Er kann mehrere Isoformen erkennen und zeigt, wie bestätigt, eine Kreuzreaktivität mit SERCA2 aus Maus und Ratte.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 115 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die reduzierenden/nicht reduzierenden Bedingungen und ziehen Sie Ladekontrollen aus Geweben mit hoher SERCA2-Expression in Betracht, beispielsweise Leber und Herz.
• Für die Immunhistochemie (Paraffinschnitte) sollten geeignete Methoden zur Antigenrückgewinnung eingesetzt und die Färbung in Geweben validiert werden, von denen bekannt ist, dass sie SERCA2 exprimieren. Positive und negative Gewebekontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Für ELISA-Anwendungen verwenden Sie das rekombinante Immunogen oder gereinigtes Protein als Beschichtungsantigen. Überprüfen Sie die Beschichtungsbedingungen und eine Verdünnungsreihe des Antikörpers.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargenkonsistenz für quantitative Assays überprüft werden. Beim Wechsel der Chargen sollten Pilotexperimente durchgeführt werden.

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