Anti-SERCA2/ATP2A2 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P16615

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SERCA2/ATP2A2

• SERCA2, kodiert durch ATP2A2, ist eine magnesiumabhängige Kalzium-transportierende ATPase, die die ATP-Hydrolyse mit der Translokation von Kalziumionen aus dem Zytosol in das Lumen des sarkoplasmatischen/endoplasmatischen Retikulums koppelt (PubMed:12542527, PubMed:16402920). Zugehörige Referenzen: PMID:12542527 PMID:16402920
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei der Muskelkontraktion/-entspannung durch die Regulierung des zytosolischen Kalziumspiegels und ist essenziell für die Kalziumhomöostase in Nicht-Muskelgeweben.
• SERCA2 besitzt drei Hauptisoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen: Isoform 1, die weit verbreitet in glatter Muskulatur und Nicht-Muskelgeweben exprimiert wird; Isoformen 2 und 3, die vorwiegend in Herz- und langsam zuckender Skelettmuskulatur vorkommen.
• Als Reaktion auf Hunger ist SERCA2 durch die Interaktion mit VMP1 an der Autophagie beteiligt, um ER-Isolationsmembrankontakte für die Autophagosomenbildung zu steuern; es moduliert zudem ER-Kontakte zu Lipidtröpfchen, Mitochondrien und Endosomen (PubMed:28890335). Zugehörige Referenzen: PMID:28890335
• SERCA2 befindet sich in den Membranen des endoplasmatischen Retikulums und des sarkoplasmatischen Retikulums.
• Es ist ein entscheidender Regulator der Osteoklastendifferenzierung über TNFSF11-vermittelte Ca(2+)-Signalgebung und interagiert mit TMEM64, um die NFATC1-Aktivierung und mitochondriale ROS-Produktion voranzutreiben.
• Zu den Schlüsselwörtern gehören alternatives Spleißen, Kalziumtransport, ATP-Bindung, Magnesium, Metallbindung, Transmembran und Disulfidbrücke; posttranslationale Modifikationen umfassen Nitrierung und Phosphorylierung.
• Gewebespezifität: Isoform 1 ist am höchsten in Leber, Bauchspeicheldrüse und Lunge; intermediär in Gehirn, Niere und Plazenta; niedriger in Herz- und Skelettmuskulatur. Isoformen 2 und 3 sind spezifisch für Herz- und langsam zuckende Muskeln.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen-Peptid (AS 943-1042) zielt auf die C-terminale Region von SERCA2 ab. Angesichts der hohen Sequenzähnlichkeit zwischen den Isoformen sollte eine mögliche Erkennung mehrerer Isoformen je nach Probentyp in Betracht gezogen werden.
• Für WB sollte eine erwartete Bande bei etwa 115 kDa beobachtet werden; validieren Sie die Spezifität mithilfe von Knockout-Kontrollen oder siRNA-Knockdown-Experimenten.
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für den Zielzelltyp; beachten Sie, dass SERCA2 in ER/SR-Membranen lokalisiert ist, sodass die Färbung netzartig erscheinen kann.
• Bestätigen Sie bei IP und ELISA die Antikörperleistung mit rekombinantem Protein oder endogenen Proben; eine Titration kann erforderlich sein, um einen hohen Hintergrund zu vermeiden.

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