Anti-Septin 8 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q92599

Kern-Produktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Septin-8

• Septin-8 ist ein filamentbildendes zytoskelettales GTPase, das zur Septin-Familie von Proteinen gehört. Es spielt eine Rolle bei der Sekretion von Blutplättchen, indem es an der Bildung von SNARE-Komplexen in synaptischen Vesikeln beteiligt ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:15116257
• Das Protein stabilisiert die BACE1-Proteinspiegel und fördert die Sortierung und Ansammlung von BACE1 in Recycling- oder endosomalen Kompartimenten, wodurch es die beta-amyloidogene Verarbeitung von APP moduliert.
• Es existieren mehrere Isoformen durch alternatives Spleißen. Isoform 2 wird auf niedrigem Niveau in bestimmten Hirnarealen exprimiert, während die Isoformen 1 und 3 stark im Okzipitalpol, Frontallappen, Temporallappen und Putamen exprimiert werden. Isoform 2 ist stark in Prostata, Hoden und Eierstöcken exprimiert; die Isoformen 1 und 3 werden in diesen Geweben auf niedrigem Niveau exprimiert.
• Septin-8 lokalisiert sich im Zytoplasma, Zytoskelett, synaptischen Vesikeln und präsynaptischen Endigungen. Es findet sich auch an der synaptischen Vesikelmembran, in Axonen und zytoplasmatischen Vesikeln.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Azetylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion regulieren können. Das Protein enthält eine GTP-bindende Domäne und eine Coiled-Coil-Region.
• Weit verbreitet exprimiert in Geweben mit der höchsten Häufigkeit in der Aorta sowie im Gehirn, Herzen und in Blutplättchen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 348-427) von humanem Septin-8 (NP_001287728.1), was mehrere Isoformen erkennen kann. Für WB sollten Sie Gesamtlysate aus menschlichen, murinen oder rattengeweblichen Zellen in Betracht ziehen und die erwartete Bande bei ca. 56 kDa validieren.
• Für IHC-P sollten die optimalen Bedingungen für die Antigen-Retrieval bestimmt werden; Gehirn- oder Aorta-Schnitte sind geeignete positive Kontrollen angesichts der hohen Expression in diesen Geweben.
• Bei IF/ICC ist ein zytoskelettales und punktförmiges zytoplasmatisches Färbungsmuster zu erwarten; eine Co-Färbung mit synaptischen oder vesikulären Markern kann helfen, die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Kreuzreaktivität mit verwandten Septin-Familienmitgliedern sollte unter Verwendung gereinigter Proteine bewertet werden.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, ist die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz wichtig; Fügen Sie in allen Experimenten geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.

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