Anti-Semaphorin-4D/CD100 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für IF/ICC, FC, ELISA – Q92854

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Semaphorin-4D

• Semaphorin-4D (auch bekannt als CD100, A8, BB18, GR3) ist ein einsitziges Typ-I-Membranprotein, das sowohl in membrangebundener als auch sezernierter Form vorliegt. Es gehört zur Semaphorinfamilie und enthält eine Immunglobulindomäne.
• Es wirkt als Zelloberflächenrezeptor für die Plexine PLXNB1 und PLXNB2 und vermittelt Zell-Zell-Signale, die für die Neurogenese und Immunregulation wichtig sind. Verwandte Referenzen: PMID:20877282
• Im Nervensystem moduliert es das Neuritenwachstum und die Arborisierung durch RHOA-Aktivierung über PLXNB1 und fördert die Entwicklung inhibitorischer GABAerger Synapsen. Verwandte Referenzen: PMID:19788569
• Es steuert die Migration von Körnerzellen im Kleinhirn und Endothelzellen über den SRC-PTK2B-AKT-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:16055703
• Im Immunsystem induziert es die Aggregation von B-Zellen und erhöht deren Lebensfähigkeit in vitro, was eine Rolle in der Lymphozytenbiologie unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:8876214
• Es wird stark in Skelettmuskulatur, peripheren Blutlymphozyten, Milz und Thymus exprimiert, mit geringerer Expression in Gehirn, Niere und anderen Geweben; im Dickdarm und Leber wird es nicht nachgewiesen.
• Es wird posttranslational durch Glykosylierung und Phosphorylierung modifiziert; es liegt alternatives Spleißen vor. Subzellulär lokalisiert es sich auf der Zellmembran und wird außerdem sezerniert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die gesamte extrazelluläre Domäne (AS 22–734) ab, was bedeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich extrazelluläre Epitope erkennt. Für die Durchflusszytometrie erwägen Sie die Verwendung von lebenden, nicht permeabilisierten Zellen, um die Oberflächenfärbung zu überprüfen.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) erfordert die Membranlokalisation eine korrekte Permeabilisierung mit Detergenzien wie Triton X-100 in niedrigen Konzentrationen. Validieren Sie die Färbemuster in Zelllinien, die bekanntermaßen Semaphorin-4D exprimieren.
• Im ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; bei der Arbeit mit komplexen biologischen Proben sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der Semaphorinfamilie überprüft werden.
• Aufgrund von alternativem Spleißen und Glykosylierung kann das beobachtete Proteingewicht im Western Blot variieren; wenn Sie diesen Antikörper für Western Blot verwenden, validieren Sie mit geeigneten Kontrollen und beachten Sie, dass das Immunogen ein rekombinantes Protein ist.

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