Anti-SEC61B Kaninchen-Polyclonales Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P60468

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SEC61B

• SEC61B kodiert die Beta-Untereinheit des SEC61-Translokon-Komplexes, einer zentralen Komponente der Proteintranslokationsmaschinerie des Endoplasmatischen Retikulums (ER). Verwandte Referenzen: PMID:12475939
• Der SEC61-Komplex bildet einen Ribosomenrezeptor und eine gesteuerte Pore in der ER-Membran, die den kotranslationalen Import von Vorläuferpolypeptiden mit Signalpeptid ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:12475939
• Er vermittelt außerdem die Insertion von Transmembranproteinen in die ER-Membran und arbeitet zusammen mit dem Multi-Pass-Translokon (MPT)-Komplex für mehrfachspanende Membranproteine. Verwandte Referenzen: PMID:32820719, PMID:36261522
• SEC61B kooperiert mit dem translokierenden Protein TRAM1, um den Import neu synthetisierter Proteine in das ER zu erleichtern. Verwandte Referenzen: PMID:19121997
• Subzellulär ist SEC61B ein integraler Bestandteil der Membran des Endoplasmatischen Retikulums.
• Das Protein erfährt mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Acetylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität oder Stabilität regulieren können.
• Als Schlüsselspieler bei der Proteintranslokation ist SEC61B mit Prozessen wie Proteintransport, Translokation und Organisation der ER-Membran verbunden.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blot (WB) beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht von SEC61B etwa 10 kDa. Verwenden Sie ein 12–15 %iges SDS-PAGE-Gel und optimieren Sie den Transfer auf eine PVDF-Membran mit 0,2 µm Porengröße für kleine Proteine. Fügen Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. HeLa-, HEK293- oder Gewebslysate mit SEC61B-Expression) hinzu und validieren Sie die Antikörperspezifität mit einem blockierenden Peptid oder einer Knockout-Probe.
• Für Immunfluoreszenz/Immuncytochemie (IF/ICC) wird eine Fixierung mit 4 % PFA gefolgt von einer Permeabilisierung mit 0,1 % Triton X-100 empfohlen. Testen Sie die Antikörperkonzentration im Bereich 1:50–1:200 und bestätigen Sie die Lokalisation am ER. Eine Co-Färbung mit einem ER-Marker (z. B. Calnexin oder PDI) kann helfen, die Spezifität zu überprüfen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu ermitteln, und validieren Sie mit rekombinantem SEC61B-Protein oder Zelllysat. Führen Sie eine Kreuzreaktivitätsprüfung mit Maus- und Rattenproben durch, um die Leistung zu bestätigen.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz überwacht werden. Erwägen Sie nach Erhalt eine Aliquotierung und führen Sie für jede neue Charge eine Vorstudie durch, um die experimentelle Reproduzierbarkeit zu erhalten.

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