Anti-SDHA monoklonaler Antikörper für WB, IF, ELISA - P31040

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SDHA-Funktion und -Lokalisierung

• SDHA kodiert die Flavoprotein-Untereinheit der Succinat-Dehydrogenase (SDH), einem Enzymkomplex (Komplex II) der mitochondrialen Atmungskette, der die Succinat-Oxidation mit der Ubichinon-Reduktion koppelt (PubMed:10746566, PubMed:24781757).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:10746566 PMID:24781757

• Das Protein katalysiert auch die Oxidation von Malat zu Enol-Oxalacetat, einem potenten SDH-Inhibitor, der anschließend zu Keto-Oxalacetat isomerisiert wird (nach Homologie).

• SDHA wirkt als Tumorsuppressor; Funktionsverlust-Mutationen sind mit Paragangliomen und gastrointestinalen Stromatumoren assoziiert (PubMed:20484225).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:20484225

• SDHA ist in der inneren Mitochondrienmembran lokalisiert und essentiell sowohl für den Zitronensäurezyklus als auch für die oxidative Phosphorylierung.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die Enzymaktivität regulieren können; das Protein enthält auch einen kovalent gebundenen FAD-Kofaktor.

• Klinisch sind SDHA-Mutationen mit dem Leigh-Syndrom, Kardiomyopathien und anderen primären mitochondrialen Erkrankungen verbunden (Schlüsselwörter: Krankheitsvariante, Primäre mitochondriale Erkrankung).

• Mehrere Transkriptvarianten, die verschiedene Isoformen kodieren, wurden identifiziert (alternatives Spleißen).

• Das Protein hat eine vorhergesagte molekulare Masse von 72,7 kDa, wandert aber üblicherweise bei ~73 kDa im SDS-PAGE.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer konservierten C-terminalen Region (aa 550–650), was darauf hindeutet, dass alle bekannten menschlichen SDHA-Isoformen erkannt werden; überprüfen Sie dies in den entsprechenden Probesystemen.

• Verwenden Sie für den Western Blot reduzierende Bedingungen und laden Sie die geeignete Proteinmenge; die erwartete Bande liegt bei ca. 73 kDa. Validieren Sie mit einer Positivkontrolle wie HeLa- oder HEK293-Zelllysaten.

• In Immunfluoreszenz-Assays sollte die mitochondriale Färbung vorherrschen; optimieren Sie die Fixierung (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierung (z. B. 0,1 % Triton X-100) für das beste Signal.

• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit murinem und Ratten-SDHA, was ihn für Studien in diesen Spezies geeignet macht; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem Modell durch Testung von Lysaten oder Gewebeschnitten.

• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie eine Kombination mit einem Detektionsantikörper in Betracht ziehen, der ein nicht überlappendes Epitop erkennt.

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