Anti-SARS-CoV Spike RDB Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P59594

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SARS-CoV Spike RBD

• Das SARS-CoV Spike-Glykoprotein (auch bekannt als E2 oder Peplomerprotein) wird durch das S-Gen kodiert und ist essenziell für den Eintritt des Virus in Wirtszellen.
• Es vermittelt die virale Bindung durch Bindung an die Wirtsrezeptoren Angiotensin-Converting-Enzym 2 (ACE2) und CLEC4M/DC-SIGNR und löst so die Internalisierung des Virions in Endosomen aus.
• Nach der Rezeptorbindung und proteolytischen Aktivierung durch Wirts-Kathepsine wirkt das Spike-Protein als virales Fusionsprotein der Klasse I und treibt die Fusion zwischen der viralen und der Wirtszellmembran voran.
• Die Rezeptorbindedomäne (RBD) in der S1-Untereinheit ist direkt für die Interaktion mit ACE2 verantwortlich und ein Hauptziel für neutralisierende Antikörper.
• Das Protein weist zudem immunmodulatorische Funktionen auf, wie die Herunterregulierung des wirtseigenen Tetherins (BST2) über lysosomalen Abbau, um angeborene antivirale Immunantworten zu bekämpfen.
• Subzellulär lokalisiert sich das Spike-Glykoprotein an der Virionmembran, der Wirts-Endoplasmas Reticulum-Golgi-Zwischenkompartment (ERGIC)-Membran und der Wirtszellmembran.
• Es ist umfassend posttranslational modifiziert, mit Glykosylierung, Disulfidbindungen und Palmitoylierung, die für seine Struktur und Funktion entscheidend sind.
• Zusätzliche Schlagwörter: virale Immunevasion, Hemmung der angeborenen Wirtsimmunantwort, Virulenzfaktor.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 350-450 des Spike RBD abdeckt (basierend auf der Zugangsnummer NP_828851.1); berücksichtigen Sie diese Epitopregion bei der Gestaltung von Nachweistests.
• Dieser polyklonale Antikörper ist für Western Blot (WB) und ELISA-Anwendungen geeignet; Nutzer sollten die Verdünnungsverhältnisse optimieren und die Leistung in ihren spezifischen Probematrizen validieren.
• Aufgrund der nachgewiesenen Kreuzreaktivität mit SARS-CoV kann der Antikörper auch Spike-Proteine eng verwandter Stämme erkennen, aber die Reaktivität mit anderen Coronaviren muss experimentell überprüft werden.
• Für den WB-Nachweis beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht des volllängen Spike-Glykoproteins ungefähr 139 kDa, aber abhängig von der Probenvorbereitung können Spaltprodukte oder Abbaubanden auftreten.
• Im ELISA kann die Kombination dieses Antikörpers mit einem geeigneten Fangantikörper oder einer Antigenbeschichtungsstrategie, die auf die RBD abzielt, die Assayempfindlichkeit verbessern; erwägen Sie vorläufige Schachbretttiterungen.

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