Anti-SARS-CoV-Spike-Polyklonaler Antikörper für WB & ELISA - P59594

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SARS-CoV-Spike-Funktion und Lokalisation

• Das SARS-CoV-Spike-Glykoprotein (auch bekannt als E2 oder Peplomer-Protein) wird durch das S-Gen kodiert und hat ein Molekulargewicht von etwa 139 kDa. Es handelt sich um ein Klasse-I-Virusfusionsprotein, das für den Eintritt von SARS-CoV essentiell ist.
• Das Protein heftet das Virion an Wirtszellrezeptoren, hauptsächlich humanes ACE2 und CLEC4M/DC-SIGNR, und initiiert so die Infektion. Nach der Rezeptorbindung wird das Virus in Endosomen internalisiert.
• Die endosomale Ansäuerung löst die Kathepsin L (CTSL)-Proteolyse aus, die das Spike-Protein spaltet und die Fusionspeptidsequenz in der S2-Untereinheit freilegt, wodurch die Membranfusion aktiviert wird.
• Spike vermittelt die Fusion von viraler und Wirtsmembran über eine Trimer-of-Hairpins-Struktur, die von Heptad-Repeat-Regionen gebildet wird. Diese Konformationsänderung treibt die Membranannäherung und -fusion an.
• Zusätzlich kann Spike das Wirtsprotein Tetherin (BST2) herunterregulieren, indem es es für den lysosomalen Abbau markiert und so der angeborenen Immunantwort des Wirts entgegenwirkt.
• Subzellulär findet sich das Spike-Protein in der Virionmembran, der Membran des endoplasmatischen Retikulum-Golgi-Zwischenkompartiments des Wirts und der Wirtszellmembran.
• Mit dem Protein assoziierte Schlüsselwörter sind virales Hüllprotein, Wirt-Virus-Interaktion, virale Immunabwehr und virales Eindringen in das Wirtszytoplasma, was seine vielseitige Rolle bei der Infektion widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus den Aminosäuren 600–700 des Spike-Proteins (NP_828851.1), das innerhalb der S2-Untereinheit liegt. Von diesem Antikörper wird erwartet, dass er sowohl das vollständige Spike-Protein als auch das S2-Spaltprodukt erkennt.
• Für den Western Blot (WB) kann ein Band nahe 139 kDa, das dem vollständigen Spike-Protein entspricht, beobachtet werden, und unter reduzierenden Bedingungen können auch S2-Fragmente erscheinen. Ziehen Sie die Verwendung geeigneter Positivkontrollen in Betracht, wie z. B. SARS-CoV-infizierte Zelllysate oder rekombinantes Spike-Protein.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Einfangen oder Nachweis des SARS-CoV-Spike-Proteins verwendet werden. Optimieren Sie die Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen und validieren Sie bei Bedarf die Spezifität gegenüber anderen Coronaviren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er Chargen-zu-Charge-Schwankungen aufweisen. Es wird empfohlen, den Antikörper für jede Anwendung zu titrieren und die Leistung im relevanten Proben system zu bestätigen.

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