Anti-SARS-CoV-2 Spike S1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SARS-CoV-2 Spike S1 Funktion und Lokalisierung

• Das SARS-CoV-2 Spike (S) Glykoprotein vermittelt den Viraleintritt durch Bindung an den Wirtsrezeptor ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086) und Auslösung der Membranfusion. Verwandte Referenzen: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Es wird als Vorläufer synthetisiert und in S1- und S2-Untereinheiten gespalten; S1 enthält die Rezeptorbindedomäne, während S2 die Fusion vermittelt (PubMed:34561887). Verwandte Referenzen: PMID:34561887
• Der Viraleintritt kann über direkte Fusion an der Zellmembran nach S2'-Spaltung durch TMPRSS2 oder über Endozytose, die durch Cathepsin L (CSTL) ermöglicht wird, erfolgen (PubMed:32075877, PubMed:32221306, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Verwandte Referenzen: PMID:32075877, PMID:32221306, PMID:32703818, PMID:34159616
• Alternative Rezeptoren umfassen NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293), Integrine (PubMed:35150743) und ASGR1 (PubMed:34837059), was den Tropismus für das Riechepithel erklären könnte (PubMed:33082293). Verwandte Referenzen: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Das S-Protein ist ein Klasse-I-Virusfusionsprotein, das irreversible Konformationsänderungen vom Prä-Fusions- zum Post-Fusionszustand durchläuft, angetrieben durch die Bildung einer Heptaden-Wiederholungs-Coiled-Coil-Struktur (PubMed:34561887). Verwandte Referenzen: PMID:34561887
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Virionmembran, Wirts-ER-Golgi-Zwischenkompartimentmembran und Wirtszellmembran.
• Das Protein ist stark glykosyliert, enthält Disulfidbindungen und ist palmitoyliert, mit einem Molekulargewicht von ~141 kDa.
• Schlüsselwörter heben Rollen bei Virusbindung, Membranfusion, Immun-Evasion und Superantigen-Aktivität hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 11–682 innerhalb der N-terminalen Domäne der S1-Untereinheit; daher eignet sich dieser Antikörper zum Nachweis der S1-Untereinheit oder des Voll-Länge-Spike-Proteins unter denaturierenden/reduzierenden Western-Blot-Bedingungen. Erwarten Sie ein Band bei ~141 kDa für das Voll-Länge-Spike-Protein, mit möglichen niedrigeren Banden, die S1 (~75–80 kDa) nach Spaltung repräsentieren.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie die Permeabilisierungsbedingungen optimieren, da das Spike-Protein durch den ER-Golgi-Apparat transportiert wird und an der Plasmamembran lokalisiert ist.
• Dieser Antikörper wurde für Immunpräzipitations-(IP)-Anwendungen validiert; bestätigen Sie die Kompatibilität mit Ihrem Lysepuffer und den Ziel-Expressionsniveaus.
• Beim ELISA sollten Sie die Kombination mit einem S2-spezifischen Antikörper in Betracht ziehen, um das Voll-Länge-Spike-Protein von freigesetztem S1 zu unterscheiden, was für die Entwicklung diagnostischer Assays relevant ist.
• Validieren Sie den Antikörper immer im relevanten Proben-System (z.B. SARS-CoV-2-infizierte Zellen, Spike-transfizierte Zellen oder rekombinantes Protein) und schließen Sie geeignete Kontrollen ein.

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