Anti-SARS-CoV-2-Spike-S1-Kaninchen-polykolonaler Antikörper für WB, ELISA – P59594

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Spike-Glykoproteins (S1)

• Proteinidentität: Das SARS-CoV-Spike-Glykoprotein, auch als E2 oder Peplomerprotein bekannt, ist ein virales Fusionsprotein der Klasse I mit einem Molekulargewicht von 139 kDa, das für den Viruseintritt essenziell ist.
• Anheftung und Eintritt: Die S1-Untereinheit vermittelt die Anheftung an Rezeptoren der Wirtszelle (z. B. humanes ACE2 und CLEC4M/DC-SIGNR) und leitet dadurch die Infektion sowie die anschließende Internalisierung des Virus in Endosomen ein.
• Fusion: Nach der Endozytose legt die durch Cathepsin-CTSL vermittelte Proteolyse das Fusionspeptid in S2 frei, was zur Membranfusion zwischen Virion und Zellmembranen des Wirts führt.
• Fusogener Mechanismus: Das Protein durchläuft mindestens drei Konformationszustände – die native Präfusionsform, das Prä-Haarnadel-Intermediat und die Haarnadelstruktur nach der Fusion –, wobei coiled-coil-Regionen eine Haarnadel-Trimerstruktur bilden, die das Aneinanderführen der Membranen bewirkt.
• Virales Fusionspeptid: Eine kurze Region innerhalb von S2, die nach der Spaltung exponiert wird, lagert sich direkt in Wirtsmembranen ein und fördert dadurch die Fusion.
• Immunflucht: Reguliert das Wirts-Tetherin (BST2) durch lysosomalen Abbau herunter, um dessen antivirale Aktivität zu neutralisieren.
• Subzelluläre Lokalisation: Vorkommen in der Virionmembran, der Membran des endoplasmatischen Retikulums/Golgi-Übergangskompartiments der Wirtszelle und der Zellmembran der Wirtszelle; klassifiziert als virales Hüllprotein und Transmembranhelixprotein.
• Wichtige Modifikationen: Glykoprotein mit Disulfidbindungen, Palmitoylierung (Lipoprotein) und Signalpeptid; zu den strukturellen Merkmalen gehören für die Fusion essenzielle coiled-coil-Domänen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–100 am N-Terminus der S1-Untereinheit umfasst; die resultierende Antikörperpopulation kann lineare Epitope innerhalb dieser Region erkennen, einschließlich potenzieller Glykosylierungsstellen.
• Für den Western Blot sollten reduzierende und nicht reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um den Einfluss von Disulfidbindungen auf die Verfügbarkeit von Epitopen zu untersuchen; außerdem sollte eine Validierung mit Lysaten SARS-CoV-infizierter Zellen oder rekombinantem Spike-Protein erfolgen.
• Bei ELISA-Anwendungen bietet die polykolonale Beschaffenheit eine hohe Avidität; testen Sie sowohl direkte als auch Capture-Formate und schließen Sie geeignete Kontrollantigene (z. B. rekombinantes S1, S-Trimer) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit SARS-CoV deutet auf eine potenziell breite Erkennung verwandter Coronaviren hin; eine zusätzliche Validierung mit SARS-CoV-2-Spike-Varianten kann sinnvoll sein.

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