Anti-SARS-CoV-2 Spike RBD polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Spike-Glykoproteins

• Das Spike-Glykoprotein (S) ist ein Vorläufer-Fusionsprotein, das den viralen Eintritt vermittelt, indem es an den Wirtsrezeptor ACE2 bindet und die Membranfusion auslöst. Zugehörige Referenzen: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Nach der Spaltung legt die S2-Untereinheit Fusionspeptide für die direkte Zellmembranfusion frei; alternativ führt ungespaltenes S zur Endozytose und Fusion über endosomale Wege. Zugehörige Referenzen: PMID:34561887, PMID:32075877, PMID:32221306
• Alternative Wirtsrezeptoren umfassen NRP1/NRP2, Integrine und ASGR1, was einen ACE2-unabhängigen Eintritt ermöglicht und zum Gewebetropismus beiträgt. Zugehörige Referenzen: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Das S-Protein wird während des Eintritts durch Wirtsproteasen TMPRSS2 oder Cathepsin L (CSTL) gespalten, was irreversible Konformationsänderungen auslöst. Zugehörige Referenzen: PMID:32703818, PMID:34159616
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbrücken und Palmitoylierung, die für Struktur und Funktion entscheidend sind.
• Subzelluläre Lokalisierung: Virion-Membran, ER-Golgi-Intermediärkompartiment-Membran des Wirts und Wirtszellmembran.
• Enthält eine Rezeptor-Bindungsdomäne (RBD) innerhalb der S1-Untereinheit, die direkt mit ACE2 interagiert und somit ein Hauptziel für neutralisierende Antikörper darstellt.
• Kann als Superantigen wirken und die angeborene Immunantwort des Wirts hemmen, was zur viralen Immunoevasion beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Rezeptor-Bindungsdomäne (AS 332-550) des SARS-CoV-2 Spike-Proteins, wodurch dieser Antikörper für den Nachweis der RBD in Assays wie Western Blotting (WB), ELISA und Immunpräzipitation (IP) geeignet ist.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte der Antikörper in infizierten Zelllinien oder Spike-transfizierten Zellen unter geeigneten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen validiert werden.
• Als polyklonaler Antikörper kann er mehrere Epitope auf der RBD erkennen; führen Sie Titrationen durch und verwenden Sie geeignete Kontrollen (z. B. negative Zelllysate, Isotyp-Kontrollen), um die Spezifität sicherzustellen.
• Kreuzreaktivität ist für SARS-CoV-2 berichtet; die Reaktivität mit anderen Coronaviren oder Varianten sollte experimentell bestätigt werden.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht des Spike-Proteins in voller Länge beträgt etwa 141 kDa; gespaltene oder glykosylierte Formen können jedoch unterschiedlich wandern; ziehen Sie die Verwendung einer Positivkontrolle in Betracht.

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