Anti-SARS-CoV-2 Spike Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - P0DTC2

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: SARS-CoV-2 Spike-Funktion und -Lokalisierung

• Das SARS-CoV-2-Spike-Glykoprotein (S), auch bekannt als E2 oder Peplomer-Protein, ist ein virales Fusionsprotein der Klasse I, das den Eintritt des Virus in Wirtszellen vermittelt und ein primäres Ziel für neutralisierende Antikörper ist.
• Das S-Protein heftet das Virion an die Wirtszelle, indem es an den Rezeptor für das Angiotensin-konvertierende Enzym 2 (ACE2) bindet und die Infektion einleitet.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:32142651
  PMID:32155444
  PMID:33607086
• Alternative Eintrittsrezeptoren umfassen Neuropilin-1/2 (NRP1/NRP2) und Integrine, die zur Gewebstropismus beitragen; beispielsweise erklärt die Verwendung von NRP1/NRP2 den viralen Tropismus in ACE2-armen Riechepithelzellen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:33082294
  PMID:33082293
  PMID:35150743
• Das vollständige Spike-Vorläuferprotein (~141 kDa) wird proteolytisch in die S1- und S2-Untereinheiten verarbeitet. Nach der Rezeptorbindung löst die S2′-Spaltung durch Wirtsproteasen wie TMPRSS2 oder Cathepsin L irreversible Konformationsänderungen aus, die virale und zelluläre Membranen verschmelzen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:32142651
  PMID:32703818
  PMID:34159616
  PMID:34561887
• Das S-Protein lokalisiert sich in der Virionmembran, der Membran des endoplasmatischen Retikulums-Golgi-Zwischenkompartments (ERGIC) des Wirts und der Wirtszellmembran.
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Palmitoylierung, einen transmembranen Anker und durch Disulfidbrücken stabilisierte Coiled-Coil-Heptad-Wiederholungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen-Peptid (Aminosäuren 600–700) überspannt die S1/S2-Verbindungsstelle; daher kann der Antikörper sowohl das vollständige Spike (~141 kDa) als auch die S2-Untereinheit unter reduzierenden Bedingungen nachweisen. Erwägen Sie, sowohl reduzierende als auch nicht-reduzierende SDS-PAGE für Western Blots zu testen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Ihre Zielzelllinie oder Ihr Gewebe optimiert werden, da die Spike-Lokalisierung (Oberfläche vs. intrazellulär) vom Expressionskontext abhängt.
• In ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz bewertet werden; die Paarung mit einem monoklonalen Anti-Spike-Antikörper kann die Assay-Spezifität verbessern.
• Für die Immunpräzipitation (IP) validieren Sie die Fähigkeit des Antikörpers, native Spike-Komplexe im relevanten Probensystem herunterzuziehen, da die konformationelle Integrität die Bindung beeinflussen kann.
• Dot Blot (DB) kann als schnelles Screening-Tool dienen; jedoch sollte die Empfindlichkeit mit quantitativen Methoden wie ELISA für eine definitive Analyse verglichen werden.
• Die Kreuzreaktivität ist für SARS‑CoV‑2 bestätigt; die Reaktivität mit Spike-Proteinen anderer Coronaviren (z. B. SARS‑CoV, MERS‑CoV) wurde nicht bestimmt und sollte bei Bedarf getestet werden.

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