Anti-SARS-CoV-2 NSP7 Kaninchen-poliklonale Antikörper für WB, ELISA – P0DTC2

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Spike-Glykoproteins (S)

• Das Spike-Glykoprotein (S), auch bekannt als E2 oder Peplomerprotein, wird vom S-Gen von SARS-CoV-2 codiert und vermittelt den Eintritt des Virus in Wirtszellen.
• Das S-Protein bindet das Virion an die Wirtszellmembran durch primäre Interaktion mit dem ACE2-Rezeptor (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Zugehörige Referenzen: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Viraler Eintritt kann auch über alternative Rezeptoren erfolgen, darunter NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293) und Integrine (PubMed:35150743), was zur Tropismus für olfaktorische Epithelzellen beitragen kann. Zugehörige Referenzen: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743
• Nach der Rezeptorbindung wird das S-Protein durch die Wirts-TMPRSS2 oder Kathepsin L proteolytisch gespalten, um die Membranfusion auszulösen; es wirkt als virales Fusionsprotein der Klasse I (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616, PubMed:34561887). Zugehörige Referenzen: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• Das Spike-Präkursor wird in die Untereinheiten S1 und S2 prozessiert; die S2-Untereinheit enthält Fusionspeptide und Heptad-Wiederholungen, die sich umfalten, um die Verschmelzung der viralen Hülle und der Wirtsmembran zu antreiben.
• Subzellulär lokalisiert sich das Spike-Protein an der Virionmembran, im intermediären Kompartiment zwischen endoplasmatischem Retikulum und Golgi-Apparat des Wirts sowie an der Wirtszellmembran.
• Die Stieldomäne von S enthält drei flexible Scharniere, die dem rezeptorbindenden Kopf beträchtliche Orientierungsfreiheit gewähren (PubMed:32817270). Zugehörige Referenzen: PMID:32817270

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes NSP7-Proteinfragment; für Western Blot sollten Sie die Detektion von endogenem NSP7 in SARS-CoV-2-infizierten Zelllysaten validieren oder rekombinantes NSP7 als Positivkontrolle verwenden.
• Als polyklonaler Antikörper kann es zu Chargenschwankungen kommen; führen Sie geeignete Negativkontrollen durch und optimieren Sie die Verdünnungsfaktoren für jede neue Charge.
• Für ELISA kann die Kombination mit einem validierten NSP7-Detektionsantikörper oder -Antigen die Assay-Empfindlichkeit verbessern; führen Sie Checkerboard-Titrationen durch, um die optimalen Konzentrationen zu bestimmen.
• Beachten Sie, dass das vorhergesagte Molekulargewicht von NSP7 etwa 9,6 kDa beträgt; wenn Sie unerwartete Banden beobachten, überprüfen Sie die Probenvorbereitung und die Antikörperspezifität.

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