Anti-SARS-CoV-2 NSP4 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P0DTD1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NSP4-Funktion und Lokalisierung

• Das SARS-CoV-2 nicht-strukturelle Protein 4 (NSP4) ist eine Komponente des Replikase-Polyproteins 1ab (pp1ab), das vom ORF1ab-Gen kodiert wird.
• NSP4 ist zusammen mit NSP3 essentiell für die Bildung von Doppelmembranvesikeln (DMVs), den viralen Replikationsorganellen.
  Verwandte Referenzen: PMID:35551511
• DMVs bieten eine schützende Mikroumgebung für die virale RNA-Synthese und schirmen sie von angeborenen Immunsensoren des Wirts ab.
• NSP4 lokalisiert in der endoplasmatischen Retikulum (ER)-Membran des Wirts, wo es Membrankrümmung und Vesikulation induziert.
• Es handelt sich um ein mehrfach membranüberspannendes Transmembranprotein, das über mehrere hydrophobe Regionen in die ER-Membran integriert ist.
• Die NSP4-Funktion ist unter Coronaviren konserviert, was ihre Bedeutung im viralen Replikationszyklus unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die C-terminale Region (aa 400–500) von NSP4, von der vorhergesagt wird, dass sie sich auf der cytoplasmatischen Seite der ER-Membran befindet; dieses Design kann die Detektion sowohl desaturierter als auch nativer Proteine in Anwendungen wie WB und IP erleichtern.
• Für den Western Blot ist zu beachten, dass das reife NSP4-Protein bei etwa 56 kDa wandert, während das vollständige pp1ab-Polyprotein ~794 kDa beträgt; optimieren Sie den Gelprozentanteil und die Transferbedingungen entsprechend.
• Für ELISA sollten Sie die Beschichtung mit rekombinantem NSP4-Protein in Betracht ziehen oder diesen Antikörper mit einem geeigneten Detektionsantikörper für Sandwich-Assays kombinieren; eine Validierung in SARS-CoV-2-infizierten Zelllysaten wird empfohlen.
• Da der Antikörper mit SARS-CoV-2 kreuzreagiert, ist er für die Untersuchung dieses spezifischen Coronavirus geeignet; testen Sie auf Kreuzreaktivität mit anderen Coronaviren, wenn breitere Anwendungen erforderlich sind.

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