Anti-SARS-CoV-2 NSP2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P0DTD1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SARS-CoV-2 NSP2

• NSP2 ist ein Nichtstrukturprotein, das aus dem Replikase-Polyprotein 1ab (ORF1ab) von SARS-CoV-2 gespalten wird, einem großen multifunktionalen Vorläufer, der an der viralen Transkription und Replikation beteiligt ist.
• NSP2 verstärkt die Repression der Wirts-mRNA durch den 4EHP-GYF2-Komplex, hemmt dadurch antivirale Antworten und erleichtert die virale Replikation. Diese Aktivität erfolgt in Zusammenarbeit mit NSP1, das ein Ribosom-Stalling auf Wirts-Transkripten induziert.
• NSP2 lokalisiert sich primär im Zytoplasma des Wirts und ist mit viralen Replikationskomplexen assoziiert, die auf vom endoplasmatischen Retikulum abgeleiteten Doppelmembranvesikeln gebildet werden.
• Im Gegensatz zu vielen anderen Nichtstrukturproteinen besitzt NSP2 keine bekannten enzymatischen Domänen; seine Rolle bei der Antagonisierung der Wirts-Immunität scheint auf Protein-Protein-Interaktionen zu beruhen, insbesondere durch Modulation des 4EHP-GYF2-Signalwegs.
• Das Polyprotein generiert auch andere kritische Enzyme: die papainähnliche Protease (nsp3), die NSP2 aus dem Vorläufer spaltet, die Hauptprotease (nsp5) und die RNA-abhängige RNA-Polymerase (nsp12).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das die Reste 150–250 von NSP2 abdeckt. Im Western Blot wird vorhergesagt, dass das reife NSP2-Protein bei ~71 kDa wandert; jedoch kann auch das全长-Replikase-Polyprotein (794 kDa) sichtbar sein, wenn die Verarbeitung unvollständig ist. Validieren Sie die detektierten Banden mit geeigneten Kontrollen (z. B. SARS-CoV-2-infizierte Zelllysate vs. Mock).
• Für ELISA sollte die Beschichtung mit rekombinantem NSP2-Protein oder viralem Lysat in Betracht gezogen werden. Führen Sie Titrationsversuche durch, um die optimalen Arbeitsverdünnungen zu bestimmen.
• Die Kreuzreaktivität wurde gegen SARS-CoV-2 bestätigt; Tests gegen andere Coronaviren oder verwandte NSP2-Homologe werden zur Bewertung von Off-Target-Effekten empfohlen.

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