Anti-S100A8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P27005

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: S100A8-Funktion und Lokalisierung

• S100A8 ist ein kleines Calcium- und Zink-bindendes Protein (10295 Da) aus der S100-Familie, auch bekannt als Calgranulin-A, MRP-8, p8 und CP-10.
• Es spielt eine bedeutende Rolle bei der Regulation von Entzündungsprozessen und angeborenen Immunantworten, hauptsächlich durch Induktion von Neutrophilen-Chemotaxis und Adhäsion.
• Intrazellulär erleichtert es als Teil des S100A8/A9 (Calprotectin)-Komplexes den Leukozyten-Arachidonsäure-Transport, moduliert die Tubulin-abhängige Zytoskelett-Reorganisation während der Phagozytenmigration und aktiviert die NADPH-Oxidase durch Förderung des Enzymkomplex-Aufbaus und Transfer von Arachidonsäure zum Komplex.
• Extrazellulär wirkt S100A8 als Alarmin oder DAMP-Molekül, bindet an Mustererkennungsrezeptoren wie TLR4 und AGER, was MAP-Kinase- und NF-κB-Signalwege auslöst, um proinflammatorische Kaskaden zu verstärken; es besitzt auch direkte antimikrobielle Aktivität über Zn²⁺-Chelatbildung.
• Das Protein kann Zelltod durch Autophagie und Apoptose induzieren, vermittelt durch Crosstalk zwischen Mitochondrien und Lysosomen unter Beteiligung von ROS und BNIP3, und es reguliert das Überleben von Neutrophilen über ITGAM/ITGB- und TLR4-vermittelte MEK-ERK-Signalwege.
• Laut UniProt-Schlüsselwörtern und Funktionsdaten ist S100A8 an S-Nitrosylierungsereignissen beteiligt, als Teil des iNOS-S100A8/A9-Transnitrosylase-Komplexes, und trägt zur ortselektiven Modifikation von Zielproteinen bei.
• Subzellulär findet sich S100A8 im Zytoplasma, assoziiert mit dem Zytoskelett, an der Zellmembran und wird auch in den extrazellulären Raum sezerniert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 1-89 von Maus-S100A8 (NP_038678.1) abdeckt. Da diese Sequenz nahezu dem vollständigen Protein entspricht (vorhergesagtes Molekulargewicht ~10 kDa), sollte der Antikörper die native Form erkennen. Für Western Blot ist ein Band bei etwa 10–12 kDa zu erwarten; Reduktion und Denaturierung können helfen, das Epitop vollständig freizulegen.
• Als polyklonaler Antikörper kann er leichte Chargen-zu-Charge-Schwankungen aufweisen; eine Validierung der Leistung mit einer bekannten Positivkontrolle wie Maus-Knochenmark- oder Milzlysat oder Zellen, die zur S100A8-Expression stimuliert wurden (z.B. LPS-behandelte Makrophagen), sollte in Betracht gezogen werden.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z.B. Citratpuffer pH 6.0, hitzeinduzierte Epitop-Freilegung) optimiert werden, und eine Quenchung der endogenen Peroxidase kann notwendig sein. Die Kreuzreaktivität mit Rattengewebe sollte wie angegeben überprüft werden.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte rekombinantes S100A8 beschichtet oder ein Sandwich-Format mit einem passenden Antikörperpaar verwendet werden; die Spezifität sollte mit relevanten Negativkontrollen bestätigt werden.

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