Anti-RXRα Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ChIP, ChIP-seq, ELISA - P19793

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RXRα-Funktion und -Lokalisierung

• RXRα (Retinsäure-Rezeptor RXR-alpha) ist ein Kernrezeptor, der durch das RXRA-Gen kodiert wird, auch als NR2B1 bezeichnet. Er gehört zur Superfamilie der Kernrezeptoren und fungiert als ligandenabhängiger Transkriptionsfaktor, der 9-cis-Retinsäure mit hoher Affinität bindet. PubMed:1310260 Verwandte Referenzen: PMID:1310260

• Im Zellkern bildet RXRα Heterodimere mit Retinsäure-Rezeptoren (RARs) und bindet an Retinsäure-Antwortelemente (RAREs), die aus tandemartigen 5'-AGGTCA-3'-Stellen (DR1-DR5) bestehen. In Abwesenheit eines Liganden rekrutieren RXR-RAR-Heterodimere Corepressor-Komplexe, die die Histondeacetylierung und Chromatinkondensation fördern und so die Transkription unterdrücken. Die Ligandenbindung löst die Dissoziation von Corepressoren und die Rekrutierung von Coaktivatoren aus, was zur transkriptionellen Aktivierung führt. PubMed:10195690, PubMed:11162439, PubMed:11915042, PubMed:20215566, PubMed:37478846, PubMed:9267036 Verwandte Referenzen: PMID:10195690 PMID:11162439 PMID:11915042 PMID:20215566 PMID:37478846 PMID:9267036

• RXRα dient als gemeinsamer heterodimerer Partner für zahlreiche andere Kernrezeptoren, einschließlich PPARα. Das RXRA/PPARA-Heterodimer ist für die transkriptionelle Aktivität von PPARα an Genen der Fettsäureoxidation wie ACOX1 und Genen des Cytochrom-P450-Systems essentiell. PubMed:10195690, PubMed:11915042, PubMed:28167758 Verwandte Referenzen: PMID:10195690 PMID:11915042 PMID:28167758

• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, wo er transkriptionsregulatorische Funktionen ausübt, sowie das Zytoplasma und die Mitochondrien. sein Shuttling kann den Kernimport von Heterodimerisierungspartnern wie VDR und NR4A1 erleichtern. PubMed:12145331, PubMed:15509776 Verwandte Referenzen: PMID:12145331 PMID:15509776

• RXRα unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindungsbildung). Diese Modifikationen regulieren seine Stabilität, DNA-Bindungsaffinität und transkriptionelle Aktivität. Schlüsselwörter: Acetylierung, Phosphoprotein, Ubl-Konjugation, Isopeptidbindung.

• Zusätzlich zur metabolischen Regulation spielt RXRα eine Rolle bei der angeborenen Immunität, indem er antivirale Gene wie Typ-I-Interferone negativ reguliert und so Immunreaktionen während einer Virusinfektion abschwächt. Es fördert auch die Phagozytose von Myelinschutt und die Remyelinisierung in Makrophagen. PubMed:25417649, PubMed:26463675 Verwandte Referenzen: PMID:25417649 PMID:26463675

• Die Gewebeexpression ist breit: hoch exprimiert in Leber, Niere und Gehirn; auch nachweisbar in Lungenfibroblasten und Monozyten. Seine Rolle bei der zellulären Seneszenz ist mit der Repression von ITPR2 und der Regulation der Kalziumsignalgebung verknüpft. PubMed:30216632, PubMed:26463675, PubMed:14702039, PubMed:2159111, PubMed:24275569 Verwandte Referenzen: PMID:30216632 PMID:26463675 PMID:14702039 PMID:2159111 PMID:24275569

• Das RXRα/RARB-Heterodimer kann je nach Kontext des RARE-DNA-Elements entweder als transkriptioneller Repressor oder Aktivator wirken, was seine vielseitige Rolle bei der Genregulation hervorhebt. PubMed:29021580 Verwandte Referenzen: PMID:29021580

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1-100) von humanem RXRα, einer Domäne, die an der ligandenabhängigen Transaktivierung und möglicherweise an Interaktionen mit Coregulatoren beteiligt ist. Diese Designstrategie kann eine hohe Spezifität und Affinität sowohl für unmodifizierte als auch für posttranslational modifizierte Formen des Rezeptors verleihen.

• Der Antikörper ist für Western Blotting (WB) validiert, um ein Band bei 51 kDa zu detektieren. Angesichts der ubiquitären Expression von RXRα in Leber, Niere und Gehirn dienen diese Gewebe als geeignete positive Kontrollen. Für die Immunpräzipitation (IP) sollten Sie in Betracht ziehen, Kernextrakte aus kultivierten Zellen oder Gewebeproben zu verwenden.

• Bei der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) und ChIP-seq wird RXRα genomweit an RAREs rekrutiert. Ein gut charakterisierter positiver Kontrollort ist das Gen für den Retinsäure-Rezeptor Beta (RARB), das ein kanonisches DR5-RARE enthält. Für beste Ergebnisse behandeln Sie die Zellen vor der Vernetzung mit 9-cis-Retinsäure oder All-trans-Retinsäure.

• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) kann der Antikörper verwendet werden, um die Translokation von RXRα in den Kern nach Ligandenstimulation zu überwachen. Eine Co-Färbung mit einem Kernmarker oder Organellmarkern (z. B. mitochondrialem Farbstoff) kann zusätzliche Kontexte zur Lokalisierung liefern.

• Bei der Durchführung eines Sandwich-ELISA kann die Kombination dieses monoklonalen Antikörpers mit einem polyklonalen Detektionsantikörper, der ein anderes Epitop anzielt, die Empfindlichkeit erhöhen. Validieren Sie den Assay unter Verwendung von rekombinanten RXRα-Proteinstandards und prüfen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität mit anderen RXR-Isoformen (RXRβ, RXRγ).

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