Anti-RUNX2 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q13950

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RUNX2

• Das Runt-verwandte Transkriptionsfaktor 2 (RUNX2), auch bekannt als Akute myeloische Leukämie 3 Protein (AML3), Core-Binding-Faktor-Untereinheit alpha-1 (CBFA1) und Osteoblast-spezifischer Transkriptionsfaktor 2 (OSF2), ist ein DNA-bindender Transkriptionsfaktor.
• RUNX2 ist ein Hauptregulator der osteoblastischen Differenzierung und Skelettmorphogenese, essenziell für die Reifung von Osteoblasten sowie sowohl die intramembranöse als auch endochondrale Ossifikation. Verwandte Referenzen: PMID:28505335, PMID:28703881, PMID:28738062
• Es bindet an die Konsensuskernsequenz 5'-PYGPYGGT-3' in Enhancern und Promotoren von Genen, die für die Osteogenese und Hämatopoese entscheidend sind, darunter Osteocalcin, Osteopontin, Knochen-Sialoprotein, Kollagen alpha 1(I), LCK, IL-3 und GM-CSF.
• In Osteoblasten wirkt RUNX2 zusammen mit SPEN/MINT, um die FGFR2-vermittelte Aktivierung des osteocalcinen FGF-responsiven Elements (OCFRE) zu verstärken und hemmt die KAT6B-abhängige transkriptionelle Aktivierung.
• Subzellulär lokalisiert sich RUNX2 sowohl im Kern als auch im Zytoplasma.
• Seine Expression ist hochspezifisch für Osteoblasten, was seine zentrale Rolle bei der Knochenbildung widerspiegelt.
• RUNX2 erfährt mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren, und ist mit Krankheitsvarianten verbunden, die mit Skelettdysplasie einhergehen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 336–439 im C-terminalen Bereich von humanem RUNX2; die Epitoperkennung kann durch posttranslationale Modifikationen oder konformelle Umgebungen in dieser Domäne beeinflusst werden.
• Für den Western Blot verwenden Sie Gesamtzelllysate aus osteoblastenähnlichen Zelllinien (z. B. Saos‑2, MG‑63) oder osteoklastendifferenzierten Kulturen und erwarten Sie eine vorherrschende Bande bei etwa 57 kDa; validieren Sie mit geeigneten Beladungskontrollen.
• Bei der Immunpräzipitation titrieren Sie die Antikörpermenge gegen eine festgelegte Lysatmenge und optimieren Sie die Bedingungen des Lysepuffers (z. B. RIPA mit Protease-/Phosphatase-Inhibitoren), um Proteinwechselwirkungen zu erhalten.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung eines rekombinanten RUNX2-Fragments, das die Immunogensequenz umfasst, als Standard; überprüfen Sie die Kreuzreaktivität mit Mausproben, wenn es auf Nagetier-Krankheitsmodelle angewendet wird.
• Kreuzreaktivität mit Maus ermöglicht vergleichende Studien in murinen Osteoblastenkulturen oder transgenen Knochenmodellen, aber überprüfen Sie immer die Leistung in dem spezifischen Gewebe oder Zelltyp von Interesse.

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