Anti-RUFY3 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB und ELISA - Q7L099

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von RUFY3

• RUFY3 (auch bekannt als RIPX, SINGAR1, ZFYVE30) ist ein Protein mit RUN- und FYVE-Domänen, das als Effektor der kleinen GTPase ARL8 fungiert und eine entscheidende Rolle bei der Verknüpfung von Endolysosomen mit dem Dynein-Dynactin-Motorkomplex für den retrograden Transport entlang von Mikrotubuli spielt. In nicht-neuronalen Zellen konzentriert diese Aktivität Endolysosomen im juxtanukleären Bereich, während sie in Hippocampusneuronen den retrograden Transport von Endolysosomen von den Axonen zum Soma antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:35314674
• Das Protein ist an der Bildung neuronaler Polarität und dem Axonwachstum beteiligt; es kann die Bildung zusätzlicher Axone hemmen, indem es die PI3K-Aktivität in kleinen neuronalen Fortsätzen unterdrückt (Durch Ähnlichkeit).
• RUFY3 ist an der Organisation des Zytoskeletts beteiligt, indem es die subzelluläre Lokalisierung von FSCN1 und DBN1 an axonalen Wachstumskegeln moduliert, und fördert die Bildung von F-Aktin-angereicherten protrusiven Strukturen an der Zellperipherie, was zu Zellmigration und Invasion beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:25766321
• Subzellulär lokalisiert sich RUFY3 im Zytoplasma, im Endomembransystem und in verschiedenen Zellvorsprüngen einschließlich Invadopodien, Wachstumskegeln, Filopodien und Lamellipodien; es kommt auch im Perikaryon und in Lysosomen vor.
• Gewebeexpressionsanalysen zeigen eine Überexpression auf Proteinebene in Magenkrebszellen und -geweben, was auf eine potenzielle onkogene Rolle hindeutet.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und wird durch Phosphorylierung reguliert; es wird unter Schlüsselwörtern wie Zellverbindung, Entwicklungsprotein, Neurogenese und Onkogen klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-65) von menschlichem RUFY3; diese Region kann über Spezies hinweg konserviert sein, was die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt, dennoch wird eine experimentelle Validierung in der Zielspezies empfohlen.
• Für Western Blot ist basierend auf dem berechneten Molekulargewicht eine Bande um 53 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. menschliche neuronale oder Krebszelllinien) und überprüfen Sie die Spezifität, insbesondere angesichts potenzieller Isoformen durch alternatives Spleißen.
• Bei ELISA-Anwendungen optimieren Sie das Beschichtungsantigen und die Nachweisbedingungen, um Linearität und Sensitivität sicherzustellen; das rekombinante Immunogen kann als Standard für die Assay-Kalibrierung dienen.
• Bei der Untersuchung von RUFY3 in neuronalen Systemen beachten Sie, dass seine Aktivität an GTP-gebundenes ARL8 gekoppelt ist; Funktionsassays können eine Koexpression oder Stimulation von endolysosomalen Transportwegen erfordern.

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