Anti-Rubicon Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q92622

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Rubicon-Funktion und -Lokalisierung

• Rubicon (Run-Domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich domain-containing protein), auch bekannt als Baron, wird durch das RUBCN-Gen (KIAA0226) kodiert. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Rubicon fungiert als zentraler Inhibitor der Autophagie und des endosomalen Traffics: Es unterdrückt die PIK3C3-Aktivität, beeinträchtigt die Funktion des PI3KC3-C2-Komplexes, blockiert die Reifung von Autophagosomen und verhindert die UVRAG-abhängige Rab7-Aktivierung an Endosomen. Verwandte Referenzen: PMID:20974968 PMID:21062745
• In aktivierten Makrophagen fördert Rubicon antibakterielle Antworten durch Stabilisierung des CYBA:CYBB-NADPH-Oxidase-Komplexes, Verbesserung der TLR2-abhängigen ROS-Produktion und phagozytischer Abtötung. Verwandte Referenzen: PMID:22423966
• Nach Pilz- oder Virusinfektion reguliert Rubicon die Produktion proinflammatorischer Zytokine negativ, indem es an CARD9 bindet und es von Signalkomplexen fernhält. Verwandte Referenzen: PMID:22423967
• Subzellulär lokalisiert Rubicon an späte Endosomen, Lysosomen und frühe Endosomen, was seinen Rollen beim endozytären Transport und bei der Regulation von Autophagosomen entspricht.
• Das Protein enthält Phosphostellen und unterliegt posttranslationalen Modifikationen; es ist in Neurodegenerationswege involviert und in Proteomikstudien identifiziert worden.
• Vorhergesagtes Molekulargewicht von 108,6 kDa; wandert experimentell bei ca. 109 kDa im SDS-PAGE.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Domäne (Aminosäuren 1-200), die alle bekannten Isoformen erkennen kann. Überprüfen Sie die Spezifität in relevanten Zell- und Gewebelysaten.
• Für Western Blotting sollten Sie ein reduzierendes SDS-PAGE und eine Nitrocellulosemembran in Betracht ziehen; die erwartete Bande liegt bei ~109 kDa.
Optimale Arbeitskonzentrationen sollten experimentell ermittelt werden; typische Startverdünnungen für polyklonale Antikörper im WB reichen von 1:500 bis 1:2000.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-Rubicon, was ihn für vergleichende Studien in Nagetiermodellen geeignet macht.
• Für ELISA sollten Sie das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle verwenden und den Antikörper entsprechend titrieren.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen experimentellen System unter Verwendung von positiven und negativen Kontrollen (z. B. RUBCN-Knockdown- oder -Knockout-Lysate).

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