Anti-RSK2 / RPS6KA3 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IHC-P, ELISA - P51812

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: RSK2-Funktion und -Lokalisierung

• RSK2 (Ribosomales Protein S6-Kinase alpha-3), auch bekannt als RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B und ISPK-1, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das RPS6KA3-Gen auf dem menschlichen X-Chromosom kodiert wird. Sie gehört zur AGC-Kinase-Familie und enthält zwei Kinase-Domänen, die durch eine Linker-Region verbunden sind.
• RSK2 wirkt stromabwärts der ERK/MAPK-Signalkaskade und phosphoryliert direkt den Transkriptionsfaktor CREB1 und Histon H3 an Ser-10 nach EGF-Stimulation, was die Expression von Immediate-Early-Genen auslöst (PubMed:10436156, 9770464).
  Verwandte Referenzen: PMID:10436156 PMID:9770464
• RSK2 fördert das Zellüberleben, indem es pro-apoptotische Faktoren wie BAD und DAPK1 phosphoryliert und inaktiviert, wodurch ihre apoptotischen Funktionen unterdrückt werden (PubMed:16213824).
  Verwandte Referenzen: PMID:16213824
• Durch die Phosphorylierung des ribosomalen Proteins S6 (RPS6) und des Translationsinitiationsfaktors EIF4B verstärkt RSK2 die cap-abhängige Translation als Reaktion auf Insulin und Mitogene (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  Verwandte Referenzen: PMID:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• RSK2 integriert Nährstoff- und Wachstumssignale durch Phosphorylierung von TSC2 und RPTOR, Schlüsselregulatoren von mTORC1, und moduliert so die mTOR-Signalgebung unabhängig vom PI3K/AKT-Weg (PubMed:18722121).
  Verwandte Referenzen: PMID:18722121
• RSK2 ist sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert und wird in vielen Geweben exprimiert, wobei die höchsten Konzentrationen in der Skelettmuskulatur gefunden werden.
• Mutationen im RPS6KA3-Gen sind mit dem Coffin-Lowry-Syndrom (CLS) assoziiert, einer X-chromosomalen intellektuellen Behinderung, die durch psychomotorische Entwicklungsverzögerungen und skelettale Anomalien gekennzeichnet ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 600-700 von humanem RSK2 entspricht, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt. Für den Western Blot wird eine Bande bei ca. 84 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung reduzierter Proben und das Laden von 20-30 µg Zelllysat. Validieren Sie die Bandspezifität mit geeigneten positiven Kontrollen (z. B. HeLa-, A431- oder NIH/3T3-Zellen) und negativen Kontrollen (z. B. RSK2-Knockout-Lysate oder siRNA-behandelte Proben).
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) wird eine hitzevermittelte Antigenretrival mit Citratpuffer (pH 6,0) empfohlen. Titrieren Sie den Primärantikörper beginnend mit einer Verdünnung von 1:50–1:200 und optimieren Sie die Detektion mit einem polymerbasierten HRP-System. Fügen Sie immer Isotypkontrollen und Gewebeschnitte ein, von denen bekannt ist, dass sie RSK2 exprimieren.
• In ELISA-Anwendungen sollte die Beschichtung mit rekombinantem RSK2-Protein oder Peptid in Betracht gezogen werden, wobei ein Standard-Indirekt-ELISA-Protokoll verwendet wird. Die optimale Arbeitskonzentration des Antikörpers sollte empirisch durch Checkboard-Titration ermittelt werden.

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